摘要目的 基于核苷酸结合寡聚化结构域受体2(NOD2)介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨宫颈癌(CC)细胞恶性行为的机制.方法 生物信息学分析确定NOD2在CC组织中的表达.将靶向 NOD2(shNOD2)、shRNAs 阴性对照(shNC)以及 NOD2过表达(NOD2)质粒和载体(Vec)转染CC细胞.通过CCK-8测定、集落形成和Transwell细胞侵袭测定来确定NOD2对CC细胞生长的影响.通过高通量RNA测序(RNA-Seq)进行转录组分析.Western blot试验检测细胞系中NOD2、AMPK/mTOR信号通路和自噬蛋白的表达.24只雌性BALB/c裸鼠随机分为4组,每组6只:载体组(Vec组)、NOD2过表达组(NOD2组)、shNC组和shNOD2组.构建小鼠远处转移模型,监测肺转移的荧光强度,计数肺转移结节的数量.结果 在线数据库分析显示,NOD2在CC组织中表达明显高于正常组织,并且不同分期的CC中NOD2的mRNA表达差异有统计学意义(P＜0.05).此外,NOD2的高表达与较差的总生存期和无病生存期相关(P＜0.05).NOD2过表达对CC细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭具有促进作用,而NOD2敲低则相反.与体外结果一致,在转移的小鼠尾静脉注射模型中,NOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较Vec组增加(P＜0.05),而shNOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较shNC组减少(P＜0.05).RNA-Seq结果显示NOD2表达与AMPK信号激活、mTOR信号抑制、自噬调节途径激活和自噬体形成显著相关.与shNC组相比,shNOD2组磷酸化AMPK、LC3蛋白表达水平减少(P＜0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平增加(P＜0.05);与Vec组相比,NOD2组LC3、AMPK蛋白表达水平增加(P＜0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平减少(P＜0.05).与shNC组相比,shNOD2组GFP-mRFP-LC3的点积累减少(P＜0.05);与Vec组相比,GFP-mRFP-LC3的点积累增加(P＜0.05).结论 NOD2可能通过AMPK/mTOR信号促进CC增殖、迁移和侵袭,其作用机制部分涉及自噬激活.