摘要目的 探讨靶向沉默DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对小鼠肺成纤维细胞(PFs)胶原沉积、增殖与迁移活性的作用.方法 为保证原代成纤维细胞的增殖迁移活性取新生C57乳鼠肺组织,剪碎后提取PFs,在显微镜下观察并鉴定形态.细胞贴壁后使用5 ng/ml TGF-β1作用24 h诱导PFs细胞活化,并用小干扰RNA构建DNMT3A沉默模型;实验分为Control组、TGF-β1组、TGF-β1+siRNA-NC 组和 TGF-β1+siRNA-DNMT3A 组.应用 Western blot 方法检测 DNMT3A、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)的蛋白表达变化;应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测DNMT3A、α-SMA、Collagen Ⅰ的mRNA表达变化;CCK-8与EdU染色检测PFs增殖能力;划痕实验与Transwell迁移实验检测PFs迁移能力.结果 与Control组相比,TGF-β1诱导活化的PFs细胞组中DNMT3A升高(P＜0.01),纤维化与增殖相关指标α-SMA、Collagen Ⅰ的蛋白及mRNA水平也升高(均P＜0.05),同时PFs的增殖与迁移能力升高(均P＜0.000 1).而与siRNA-NC组相比,在 DNMT3A 沉默组中通过 Western blot 法检测 DNMT3A(P＜0.000 1)及相关指标 α-SMA(P＜0.01)、Collagen Ⅰ(P＜0.01)的蛋白表达水平均降低,同时通过RT-qPCR法检测DNMT3A、α-SMA及Collagen Ⅰ的mRNA水平也均降低(P＜0.001),并且PFs细胞的增殖(P＜0.01)和迁移能力(P＜0.05)较对照组下降.结论 沉默DNMT3A能够抑制胶原的沉积及PFs的增殖,DNMT3A可以促进PFs的增殖和迁移能力,进而促进PFs的活化以及肺纤维化的发展,这一过程可能受到DNA甲基化修饰的调控.