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白藜芦醇对类风湿性关节炎患者成纤维样滑膜细胞cGAS-STING信号通路的影响

Effects of resveratrol on cGAS-STING signaling pathway in fibroblast-like synoviocytes of patients with rheumatoid arthritis

摘要目的 探究白藜芦醇(Res)对类风湿性关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞(FLS)的影响,并初步分析Res抑制FLS释放炎症因子的可能机制.方法 体外培养RA患者FLS细胞,采用不同浓度的Res(0、20、40、80、160、320 μmol/L)进行处理,12、24 h后CCK-8法分别检测FLS细胞活力;采用不同浓度的Res(0、40、80、160 μmol/L)进行处理FLS细胞24 h后,ELISA法分析FLS细胞分泌的炎症因子白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,Western blot测定细胞中环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)、干扰素刺激因子(STING)蛋白的表达水平;慢病毒感染FLS使其过表达cGAS,将细胞分为Control(对照)组、cGAS 组(cGAS 过表达)、Res+cGAS 组(Res 160 μmol/L+cGAS 过表达)、Res 组(Res 160 μmol/L).Western blot 测定各组细胞中STING蛋白的表达水平,CCK-8法检测各组FLS细胞活力,ELISA法检测各组细胞上清液中炎症因子IL-6和TNF-α含量.结果 CCK-8实验结果显示,与0 μmol/L Res组比较,使用40、80、160 μmol/L的Res处理24 h后的三组FLS细胞活力下降(P<0.01);ELISA结果也表明与0 μmol/L Res组比较,使用40、80、160 μmol/L的Res处理后的三组FLS细胞上清液中IL-6 和 TNF-α 含量也降低(P<0.01).同时,Western blot 结果显示,与 0 μnmol/L 的 Res 组相比,经过 40、80、160 μnmol/L 的Res处理后的三组FLS细胞中STING和cGAS蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).与Control组相比,过表达cGAS后,CGAS组中FLS中STING蛋白表达水平增加(P<0.05),与Res组相比,Res+cGAS组中FLS细胞上清液中炎症因子含量及FLS中STING蛋白表达水平显著增加(P<0.01,P<0.05).结论 适当剂量的Res能有效减少FLS细胞分泌炎症因子,而这一抑制作用机制可能源于其对cGAS-STING信号传导途径的阻断作用.

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