换一批耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌荚膜特异性解聚酶克隆表达及其相关功能研究
Cloning,expression,and functional analysis of capsule-specific depolymerase targeting carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae
摘要目的 构建K64型荚膜特异性解聚酶重组蛋白Dep44,探讨其在对抗耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)感染中的应用效力.方法 分离表达解聚酶的噬菌体(vB_Kpn_HF1013,GenBank:PP803128),分析其基因序列,筛选具有解聚酶活性的候选蛋白,构建重组蛋白Dep44并验证其解聚酶活性.通过滴板法验证Dep44重组蛋白的敏感谱,通过生物膜清除及血清杀菌实验评估Dep44抗菌活性.结果 噬菌体vB_Kpn_HF1013尾刺蛋白具有解聚酶活性,能特异性裂解K64型CRKP荚膜.生物膜清除实验结果显示:与对照组比较,2μg/mL与10μg/mL剂量的Dep44重组蛋白均可有效破坏细菌生物膜.血清杀菌实验结果显示:Dep44重组蛋白具有协同血清杀菌能力,但这种作用需要依赖补体系统的存在,Dep44本身不具备直接杀菌活性.结论 Dep44重组蛋白能够特异性裂解K64型CRKP荚膜,具备破坏生物膜及协同血清杀菌能力,有望应用于K64型CRKP相关感染的控制及医疗器械表面生物膜的清除.
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关键词
解聚酶噬菌体耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌荚膜生物膜重组蛋白depolymerasephagecarbapenem-resistant Klebsiella pneumoniaecapsulebiofilmrecombinant protein
栏目名称
DOI
10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2025.07.013
发布时间
2025-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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