Csf1rCre介导的黄色荧光素蛋白可有效标记各组织定居巨噬细胞
Csf1rCre-mediated yellow fluorescent protein can effectively label tissue-resident macrophages in various tissues
摘要目的 构建Csf1rCre Rosa26YFP报告基因小鼠,检测Csf1rCre介导黄色荧光素蛋白(YFP)标记单核细胞及不同组织定居巨噬细胞的效率.方法 Rosa26YFP突变小鼠具有一个loxP侧翼的STOP序列,后跟插入Rosa26基因座的黄色荧光蛋白基因(YFP).当与表达Csf1rCre重组酶的小鼠交配时,STOP序列被删除,并在双突变后代Csf1rCre Rosa26YFP的表达组织中观察到YFP表达.将Csf1rCre小鼠与Rosa26YFP小鼠交配,通过PCR筛选出Csf1rCre Rosa26YFP报告基因小鼠.分离成年Csf1rCreRo-sa26YFP小鼠的血液及骨髓单核细胞、肝脏巨噬细胞、肾脏巨噬细胞、肺泡巨噬细胞和脾脏巨噬细胞,标记流式抗体,通过流式细胞术分析Csf1rCre介导YFP标记组织巨噬细胞的效率.结果 Csf1rCre Rosa26YFP报告基因小鼠中肾脏、肝脏、脾脏、肺泡巨噬细胞表达YFP中位数为93.25%、92.45%、91.10%、94.70%,血液单核细胞表达YFP中位数为98.20%,骨髓单核细胞表达YFP中位数为93.90%.结论 Csf1rCre可以介导YFP对各组织定居巨噬细胞以及骨髓和血液单核细胞进行示踪.同时,Csf1rCre可用作这些细胞的基因条件性敲除工具鼠.
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