换一批K39型肺炎克雷伯菌噬菌体IME330的生物学特性及基因组特性分析
Biological and genomic characterization of phage IME330 of Klebsiella pneumoniae type K39
摘要目的 从医院未经处理的污水中分离一株靶向K39型肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体,并系统分析其生物学特性及基因组学信息.方法 以基于荚膜多糖基因序列鉴定的K39型肺炎克雷伯菌Kp 1000为宿主菌,采用双层琼脂平板法进行噬菌体的分离与纯化.通过负染法结合透射电子显微镜观察噬菌体的形态特征,利用噬斑法评估其裂菌谱.进一步测定噬菌体的最佳感染复数(MOI),完成一步生长曲线、温度及酸碱等耐受性实验,评估其生物学特性.最后,提取噬菌体DNA,利用Illu-mina HiSeq2000测序平台进行全基因组测序,并对测序结果进行注释与分析.结果 成功分离到一株特异性靶向K39型肺炎克雷伯菌的裂解性噬菌体,命名为IME330.透射电镜显示,该噬菌体头部直径为(75±1)nm,尾长为(185±1)nm.裂菌谱分析表明,IME330能裂解K39型肺炎克雷伯菌,显示出较窄的宿主范围和高度特异性.其最佳感染复数(MOI)为0.1,裂解量达168 PFU/cell.理化特性实验表明,IME330对高温及酸碱环境(pH 4～10)具有较强的耐受性.基因组分析显示,IME330基因组全长144 245 bp,分子量为46 463 MDa,G+C含量为44.8％,共编码320个开放阅读框.结论 IME330被鉴定为一株新型裂解性肺炎克雷伯菌噬菌体,隶属于有尾噬菌体目.该噬菌体对温度、酸碱等理化因素具有较强耐受性,且表现出高效的裂解能力,但其裂菌谱较窄,宿主特异性较高.
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关键词
肺炎克雷伯菌噬菌体生物学特性基因组特性分析透射电镜一步生长曲线K.pneumoniaephagebiological characteristicsanalysis of genomic characteristicstransmission electron microscopyone-step growth curve
分类号
R459.9（治疗学）
栏目名称
DOI
10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2025.09.009
发布时间
2025-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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