摘要目的 研究miR-21靶向调节磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路改善小鼠慢性肾纤维化的机制.方法 32只慢性肾病模型小鼠随机分为模型组、miR-21过表达组、miR-21抑制组、miR-21抑制+MK-2206组各8只,将8只健康小鼠纳入对照组.miR-21过表达组、miR-21抑制组、miR-21抑制+MK-2206组尾静脉注射慢病毒(50 μL,每只1×108 TU),每周1次,连续3周.对照组、模型组注射等量空载体(LV-NC).miR-21抑制+MK-2206组同时另灌胃AKT/mTOR通路抑制剂MK-2206 480 mg/kg,每周1次,连续3周.比较各组miR-21表达、24 h尿蛋白定量、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN),肾组织I型胶原蛋白(Collagen I)、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、PTEN蛋白表达及p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR;HE染色观察肾组织病理改变,Masson染色观察肾组织纤维化程度;双荧光素酶实验验证miR-21与PTEN的靶向关系.结果 与模型组比较,miR-21过表达组肾组织miR-21表达升高(P<0.05),miR-21抑制组肾组织miR-21表达降低(P<0.05).与模型组比较,miR-21过表达组24 h尿蛋白定量、Scr、BUN,肾组织Collagen I、Collagen Ⅲ、α-SMA蛋白表达均升高(P<0.05),而miR-21抑制组均降低(P<0.05);与miR-21抑制组比较,miR-21抑制+MK-2206组24 h尿蛋白定量、Scr、BUN,肾组织Collagen I、Collagen Ⅲ、α-SMA蛋白表达均降低(P<0.05).与模型组比较,miR-21过表达组PTEN蛋白表达降低(P<0.05),p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR升高(P<0.05);miR-21抑制组PTEN蛋白表达升高(P<0.05),p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR均降低(P<0.05);与miR-21抑制组比较,miR-21抑制+MK-2206组p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR均降低(P<0.05),PTEN蛋白表达差异无统计学意义.HE和Masson染色显示,对照组肾脏结构正常,几乎无纤维化;模型组出现肾小球增大、毛细血管袢粘连及局灶性纤维化;miR-21过表达组肾小球结构严重破坏,伴广泛纤维化和肾小管萎缩;miR-21抑制组病理变化和纤维化程度减轻;而miR-21抑制+MK-2206组仅见轻微病理改变和轻度纤维化,间质基本正常.与PTEN-WT+NC mimics组比较,PTEN-WT+miR-21 mimics组相对荧光素酶活性降低(P<0.001),PTEN-WT+NC mimics组和PTEN-MUT+miR-21 mim-ics组相对荧光素酶活性差异无统计学意义.结论 miR-21可能通过靶向调控PTEN进而抑制AKT/mTOR通路改善慢性肾病小鼠肾功能指标,减轻肾纤维化程度.