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滁菊总黄酮对大鼠大脑中动脉VSMC的BKCa通道的电流及蛋白表达的影响

The effect of Chuju total flavonoids on the current and protein expression of BKCa channels in rat middle cerebral artery VSMC

摘要目的 探究滁菊总黄酮(TFCC)舒张脑血管及硫化氢(H2S)机制与大鼠大脑中动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)上的大电导钙激活钾通道(BKCa)通道的关系,并测定TFCC对大鼠大脑中动脉VSMCs中的BKCa通道 α 蛋白表达的影响.方法 主要采用急性消化的方法分离大鼠大脑中动脉VSMCs;全细胞膜片钳的方法来检测BKCa通道电流的大小;采用原代组织贴壁法培养大鼠大脑中动脉VSMCs,以及采用Western blot方法来测定蛋白含量的表达.结果 全细胞膜片钳实验中,H2S供体NaHS(100 μmol/L)及内源性H2S均可增强BKCa通道电流;TFCC(30、90 和 270 mg/L)同样可以激活BKCa通道,并且呈现出一定浓度依赖性.在阻断了内源性H2S生成后,TFCC(270 mg/L)对大鼠大脑中动脉VSMCs的BKCa通道仍具有激活作用.在Western blot实验中,各组细胞中均有BKCa通道蛋白中α亚基的表达,但TFCC(30、90 和 270 mg/L)及抑制剂IBTX组均不影响其通道蛋白含量的表达.结论 TFCC可以通过促进内源性H2S的生成来促进BKCa通道的开放,也可以直接激活BKCa通道,从而起到舒张脑血管的作用.但TFCC对BKCa通道蛋白的表达无明显影响.

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