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采用免疫磁珠捕获念珠菌释放的幽门螺杆菌的研究

Study on the capture of Helicobacter pylori released from Candida using immunomagnetic bead

摘要目的 探究幽门螺杆菌(H.pylori)特异性基因聚合酶链式反应(PCR)阳性的临床分离的胃念珠菌、阴道念珠菌和大便念珠菌释放H.pylori的能力.方法 复苏实验室从临床分离的4株H.pylori特异性16S rDNA和ureA基因PCR阳性的念珠菌菌株及白念珠菌标准菌株ATCC10231(Ca10231),通过PCR确认5株念珠菌菌株H.pylori ureA基因阳性情况.将上述念珠菌与H.pylori菌株接种于尿素培养基,于37℃恒温培养箱进行培养,逐日观察培养基的颜色变化,若培养基颜色由黄色变为红色,则具有尿素酶活性.使用包被H.pylori抗体的磁珠与上述5株念珠菌菌株及H.pylori菌株分别进行共同孵育,通过生物扫描电子显微镜(SEM)观察磁珠表面H.pylori的吸附情况,采用PCR检测磁珠上H.pylori特异性16S rDNA、ureA基因的阳性情况.结果 通过PCR检测,4株临床来源的念珠菌的ureA基因为阳性,Ca10231的ureA基因为阴性.接种临床来源的4株念珠菌与H.pylori菌株的尿素培养基颜色由黄色变为红色,而接种Ca10231的培养基未变色,表明这4株临床来源的念珠菌菌株具有尿素酶活性,而Ca10231不具有尿素酶活性.通过SEM可观察到,与4株临床来源的念珠菌及H.pylori共同孵育后的磁珠表面都附着有H.pylori,其中与1株阴道念珠菌和1株胃念珠菌及H.pylori共同孵育的磁珠,经PCR检测,H.pylori 16S rDNA、ureA基因均为阳性;与另2株念珠菌共同孵育的磁珠,PCR为阴性.结论 部分H.pylori特异性基因阳性的念珠菌可以释放出H.pylori.

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