摘要目的 探讨大黄素调控肿瘤蛋白p53/谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)对糖尿病肾病(DN)的影响.方法 使用高糖(HG,30 mM)处理人肾小球内皮细胞(hrGECs)在体外构建DN肾损伤模型,并使用不同浓度大黄素处理hrGECs.CCK8检测细胞活力,TUNEL检测细胞凋亡,试剂盒检测氧化应激标记物-超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平.Western blot检测中性粒细胞外诱捕网(NETs)标记物瓜氨酸组蛋白-3(H3Cit)和髓过氧化物酶(MPO)的表达.网络药理学分析大黄素的靶点并进行KEGG通路富集分析和蛋白相互作用分析.使用蛋白酶体抑制(MG132)处理hrGECs,Western blot检测p53/GPX4的表达.构建p53过表达模型,验证大黄素在DN中作用的机制.链脲佐菌素(STZ)诱导DN大鼠模型,使用大黄素治疗.测量空腹血糖、24小时尿蛋白,血尿素氮(SUN)和血肌酐(Scr)水平.苏木伊红(HE)染色观察肾组织病理学改变,Masson染色检测肾纤维化程度;Western blot检测H3Cit、MPO、p53、GPX4的蛋白表达.结果 与NG组相比,HG组hrGECs细胞活力减低,细胞凋亡增多,SOD水平下调,MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α、H3Cit、MPO的表达水平下调(P均＜0.05);与HG组相比,大黄素处理增强hrGECs细胞活力,减少细胞凋亡,上调SOD的表达并抑制MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α、H3Cit、MPO的表达,并且呈剂量依赖性(P均<0.05).网络药理学分析p53是大黄素治疗DN的核心靶点.进一步研究显示,大黄素能够抑制p53表达并且上调GPX4的表达.过表达p53减弱大黄素在DN中的治疗作用,抑制细胞活力,促进凋亡,加剧氧化应激和炎症反应,促进NETs的形成(P均＜0.05).动物实验结果显示,大黄素治疗能够降低DN大鼠空腹血糖,改善大鼠肾功能,肾组织病理学改变和纤维化,抑制DN大鼠肾组织中IL-6、IL-1β、TNF-α、H3Cit、MPO、p53的高表达,促进GPX4蛋白表达(P均＜0.05).结论 大黄素通过调控p53/GPX4的表达改善DN肾损伤.