换一批敲除TMEM206基因可降低由ataxin-1中polyQ过度延伸所致的细胞凋亡
Knockout of the TMEM206 gene in SH-SY5Y cells alleviate cell apoptosis induced by polyQ-expanded ataxin-1
摘要目的 研究ataxin-1分子中polyQ过度延伸对细胞凋亡的作用,探讨敲除TMEM206基因对由ataxin-1分子中polyQ过度延伸所致细胞凋亡的影响.方法 通过DNA合成法分别获得携带29Q、65Q、82Q重复序列的ATXN1基因,将合成的ATXN1基因分别插入慢病毒表达载体pMT440,携带合成基因ATXN1的慢病毒载体pMT440再与pCMV-dR8.9和pCMV-VSV-G载体共转染,构建成ATXN1基因慢病毒表达载体,并分别导入购买的3组人神经母细胞瘤培养细胞(SH-SY5Y)中表达,通过流式细胞技术检测细胞凋亡率.另通过短发夹RNA技术(shRNA)沉默SH-SY5Y细胞TMEM206基因,再向3组细胞中分别导入能表达含29Q、65Q、82Q重复序列的ATXN1基因慢病毒表达载体,培养24 h,通过流式细胞技术检测细胞凋亡率.结果 SH-SY5Y细胞中ataxin-1分子中polyQ重复序列过度延伸至82Q和65Q时,两组过度延伸细胞的凋亡率分别为(16.70±1.40)%和(11.70±0.90)%,均高于polyQ重复序列为29Q时的细胞凋亡率(8.07±0.67)%,3组不同polyQ重复序列细胞凋亡率的改变有统计学意义(F=34.892,P<0.001).敲除SH-SY5Y细胞TMEM206基因后,ataxin-1分子中polyQ重复序列过度延伸至82Q和65Q时,两组SH-SY5Y细胞的凋亡率分别为(14.00±1.44)%和(6.71±0.53)%,也高于polyQ重复序列为29Q时细胞凋亡率(6.47±0.69)%,三者凋亡率的差异有统计学意义(F=38.680,P<0.001).敲除SH-SY5Y细胞TMEM206基因,可降低ataxin-1分子中82Q、65Q或29Q重复序列引起的凋亡,但凋亡率的降低多无统计学意义(t=2.347、6.734、1.902;P=0.079、0.003、0.130).结论 Ataxin-1分子中polyQ重复序列过度延伸可使细胞凋亡增加,敲除TMEM206基因,可降低ataxin-1分子中polyQ重复序列过度延伸所致的细胞凋亡.
更多相关知识
- 浏览6
- 被引0
- 下载3
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
