换一批微RNA-21调控的蛋白酪氨酸磷酸酶MEG2蛋白低表达促进肺癌发生发展的分子机制
Molecular mechanism of low expression of protein tyrosine phosphatase MEG2 protein regulated by miR-21 to promote lung carcinoma develpoment
摘要目的 蛋白酪氨酸磷酸酶MEG2蛋白在肺癌中异常低表达及促进肺癌发生发展的分子机制.方法 预测靶向MEG2的miRNAs;分别运用蛋白质印迹法(Western blot)和qRT-PCR检测肺癌组织的MEG2蛋白、mRNA和miR-21表达水平;将肺癌细胞分为四组,分别为过表达对照组、miR-21过表达组、抑制对照组及miR-21抑制组,在肺癌细胞中通过转染miR-21前体或反义miR-21以过表达或敲降miR-21以及利用荧光素酶报告方法检测miR-21对MEG2是否直接靶向.分别利用CCK-8、Tran-swell和细胞凋亡试剂盒检测miR-21通过调控MEG2对肺癌细胞增殖、侵袭以及凋亡的作用.结果 预测发现miR-21在MEG23'UTR上有直接结合位点.蛋白质印迹法和qRT-PCR结果显示肺癌组织MEG2和miR-21呈负相关.过表达或敲降miR-21实验显示MEG2是miR-21的直接靶基因(过表达组变化倍数:A5490.26,H19750.18;敲降组变化倍数:A5492.48,H19752.18).体外实验显示miR-21抑制MEG2的表达从而促进增殖(对照3.35,miR-21过表达4.78)以及抑制凋亡(对照5.68,miR-21过表达3.28).结论 miR-21-MEG2形成的新调控轴直接参与调节肺癌的增殖、侵袭和凋亡.
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