摘要目的 研究丹皮酚对糖尿病视网膜血管功能的保护作用及其作用机制.方法 2021年10月至2023年7月,50只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、糖尿病视网膜病变(DR)组、低剂量丹皮酚组、中剂量丹皮酚组和高剂量丹皮酚组,每组各10只.DR组和3个丹皮酚组大鼠腹腔注射链脲佐菌素构建DR动物模型.丹皮酚组大鼠经100、200和400 mg/kg丹皮酚连续灌胃12周,每天1次.对照组和DR组大鼠灌胃等量生理盐水.视网膜电图,荧光素眼底血管造影术,视网膜消化铺片,伊文思蓝和苏木精-伊红(HE)染色评价视网膜结构损伤和血管功能障碍.用高糖(35 mmol/L)处理人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)构建DR细胞模型.HRMECs分为五组:正常糖组、高糖组、低剂量丹皮酚组、中剂量丹皮酚组和高剂量丹皮酚组.正常糖组加入5.5 mmol/L葡萄糖,高糖组和3个丹皮酚组加入35 mmol/L葡萄糖.丹皮酚组分别用10、20和40 μmol/L丹皮酚处理.以噻唑蓝(MTT)、5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、划痕、Transwell和成管实验分别检测细胞活性、增殖、迁移和血管形成.转化生长因子β1(TGF-β1)含量及其mRNA水平用酶联免疫吸附试验和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测.蛋白质印迹法检测TGF-β1、c-Jun氨基端激酶(JNK)和磷酸化(p)-JNK蛋白表达水平.结果 与对照组相比,DR组大鼠血糖含量显著增加,体质量明显减少;a波振幅、a波潜时和b波潜时明显增加,而b波振幅显著降低;视网膜中血管分支数、无细胞血管数和伊文思蓝含量显著增多;视网膜组织结构松散,神经纤维层伴水肿,内外核层细胞排列不规则,有大量新生血管生成(P<0.001).与DR组比较,丹皮酚组糖含量显著降低,体质量明显增加;a波振幅、a波潜时和b波潜时明显降低,而b波振幅显著增加;视网膜中血管分支数、无细胞血管数和伊文思蓝含量显著减少;网膜组织结构较为完整,内外核层细胞排列较整齐,新生血管生成较模型组明显减少(P<0.001).与正常糖组比较,高糖组HRMECs细胞活性和EdU阳性细胞数明显减少,细胞迁移率、迁移细胞数、血管样结构数和血管分支点数明显增多;与高糖组比较,丹皮酚组细胞活性和EdU阳性细胞数明显增加,细胞迁移率、迁移细胞数、血管样结构数和血管分支点数明显减少(P<0.001).与对照组[(121.53±10.78)ng/L]和正常糖组[(299.87±15.39)ng/L]比较,DR组大鼠血清[(602.87±10.14)ng/L]及高糖组细胞上清中TGF-β1含量[(1 002.66±16.53)ng/L]显著增加(均P<0.001).与对照组(1.00±0.03)和正常糖组(1.00±0.02)比较,DR组大鼠视网膜组织(3.01±0.23)和高糖组HRMECs中(4.52±0.23)TGF-β1的mRNA表达显著增加,低、中、高剂量丹皮酚处理组视网膜组织中(2.62±0.19、1.81±0.19、1.51±0.16)和HRMECs中(3.50±0.19、2.03±0.21、1.51±0.12)TGF-β1的mRNA表达则呈剂量依赖性降低(P<0.001).与对照组(0.54±0.09、0.14±0.04)和正常糖组(0.15±0.04、0.29±0.07)比较,DR大鼠视网膜组织(0.95±0.11、1.07±0.06)和高糖组HRMECs中(1.16±0.11、0.98±0.07)TGF-β1、p-JNK蛋白表达显著增加,低、中、高剂量丹皮酚处理组视网膜组织中(0.45±0.05、0.46±0.06、0.41±0.08;0.84±0.05、0.48±0.08、0.19±0.06)和HRMECs中(0.75±0.11、0.56±0.11、0.42±0.08;0.77±0.04、0.25±0.07、0.27±0.06)TGF-β1、p-JNK蛋白表达则呈剂量依赖性降低(P<0.001).结论 丹皮酚通过抑制TGF-β1/JNK通路保护糖尿病视网膜血管功能.