换一批
换一批stomatin对非小细胞肺癌细胞中葡萄糖转运蛋白1表达及定位的影响
Effect of stomatin on the expression and translocation of glucose transporter 1 in non-small cell lung cancer
摘要目的 探究stomatin基因对非小细胞肺癌细胞中葡萄糖转运蛋白1(Glut1)表达及定位的影响.方法 采用RNA干扰技术敲降A549、H520细胞内stomatin基因,利用实时荧光定量聚合酶链反应技术及蛋白质免疫印迹技术检测Glut1在两种细胞内的表达变化.采用细胞免疫荧光染色技术对stomatin蛋白及Glut1蛋白进行定位并观察其位置变化.以PcDNA3.1(-)为载体,构建在Glut1第一个细胞外段插入flag标签的质粒3×flag-Glut1-PcDNA3.1(-),并将其导入过表达stomatin的A549、H520细胞中,利用流式细胞术检测细胞膜上Glut1的表达情况.结果 A549、H520细胞中敲降stomatin表达,Glut1的mRNA和蛋白表达量均未发生变化;A549、H520细胞中敲降stomatin表达,Glut1蛋白的主要表达位置由细胞膜转移到细胞质中;stomatin过表达的肺癌细胞A549、H520中,Glut1蛋白在细胞膜上的表达量明显上调.结论 stomatin表达的改变不影响非小细胞肺癌中Glut1的表达量,stomatin表达上调时能够促进Glut1在细胞膜上的定位,stomatin表达下调时Glut1更多定位在细胞质中.
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