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首页 > 病毒学报 > 转染E1B55K基因提高Hep2细胞包装肠腺病毒Ad41的能力

转染E1B55K基因提高Hep2细胞包装肠腺病毒Ad41的能力

Improved Replication of Enteric Adenovirus Type 41 in Hep2 Cell Line Expressing E1B55K

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学术成果认领

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摘要人F组腺病毒Ad40、Ad41难以在体外培养的细胞中传代,被称为难养腺病毒(Fastidious adenovirus).本研究观察了在Hep2细胞表达Ad41 E1B55K基因对Ad41复制的促进作用.从Ad41阳性粪便标本中用PCR的方法获得E1B55K基因,构建真核表达载体,转染Hep2细胞,筛选单克隆,用RT-PCR检测了E1B55K基因的表达.用引起293细胞完全CPE比较产毒量的方法对所得细胞克隆进行初步筛选,获得一株产毒相对较强的细胞Hep2-E1B#4.与对照细胞Hep2、Hep2-DNA3相比,等量Ad41接种Hep2-E1B#4产生的细胞病变效应(CPE)程度明显加深.用免疫细胞化学的方法测定产毒的感染滴度,等量Ad41接种后,Hep2-E1B#4产生的子代腺病毒滴度大于对照的9倍;半定量PCR测得Hep2-E1B#4子代病毒基因组拷贝数约为对照细胞的4倍.结果说明转染E1B55K基因促进了Ad41在Hep2细胞的复制,获得的Hep2-E1B#4细胞株可用于Ad41的分离、培养和体外扩增.

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作者 韩炳娟 ^[1] 郭丽 ^[2] 屈建国 ^[2] 王敏 ^[2] 王健伟 ^[3] 鲁茁壮 ^[4] 洪涛 ^[2] 学术成果认领

作者单位 山东省医学科学院,病毒学研究所,济南,250062;中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052 ^[1] 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052 ^[2] 中国医学科学院,病原生物学研究所,北京,100730 ^[3] 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052;军事医学科学院,放射与辐射医学研究所,北京,100850 ^[4]

关键词 Ad41 E1B55K gene Hep2 病毒复制

主题词细胞(Cells)基因(Genes)转染(Transfection)肠(Intestines)才能(Aptitude)

分类号 R373.2

栏目名称论著

DOI 10.3321/j.issn:1000-8721.2007.04.003

发布时间 2007-08-27

基金项目

国家自然科学基金

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2007年23卷4期

258-264页

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