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一种基于连续PMCA的PrPSc体外扩增方法的建立

Establishment of PrPSc Conversion Based on serial PMCA In Vitro

摘要为建立一种基于蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)的体外稳定扩增方法以观察PrPSc是否能在体外连续传代,我们分别制备了正常仓鼠和羊瘙痒病因子263K感染的发病仓鼠的全脑匀浆,将两种脑匀浆以不同体积比混合后,分别进行144个循环的直接PMCA和每轮48个循环、共8轮的连续PMCA,用Western blot对PrPSc的扩增情况进行检测.结果显示,与常规的直接PMCA方法相比,连续PMCA能更有效地使低浓度的PrPSc扩增到可检出的水平,表明连续PMCA可以支持羊瘙痒因子263K在体外长期稳定的复制.连续PMCA方法是一种体外高效地扩增PrPSc的方法,有潜力成为一种Prion体外培养方法,用于研究Prion错误折叠和复制机制,以及检测脑组织、外周组织和体液样品中的微量PrPSc.

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分类号 R373.9
栏目名称 论著
DOI 10.3321/j.issn:1000-8721.2008.04.007
发布时间 2008-09-24
基金项目
国家科技攻关计划 国家重点基础研究发展计划(973计划) 国家自然科学基金
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病毒学报

病毒学报

2008年24卷4期

282-286页

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