换一批负链不分节段RNA病毒反向遗传系统中通用型真核表达载体的构建
Construction of Eukaryotic Expression Vector of General Type in Reverse Genetic Systems of Non-segmented Negative Strand RNA Virus
摘要本研究选择pVAX1作为供体载体,通过分子克隆方法,分别用人工合成的锤头型核酶、丁型肝炎核酶序列(用于获得转录后病毒基因组RNA的精确末端)和含有9个常用限制性酶切位点的linker序列(用于病毒基因组插入的多克隆酶切位点)取代真核表达载体pVAX1的多克隆酶切位点,将其改造成负链不分节段RNA病毒反向遗传系统的通用型表达载体.通过酶切鉴定和序列测定表明,pVAX1载体中插入的核酶及linkef序列正确无误,并将CTN株狂犬病病毒全长基因组cDNA插入pVAX-R中,通过与辅助质粒的共转染成功拯救CTN株狂犬病毒,证明通用型真核表达载体构建成功,为快速建立负链不分节段RNA病毒反向遗传系统奠定基础.
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关键词
负链不分节段RNA病毒反向遗传真核表达载体构建non-segmented negative strand RNA virusreverse geneticsexpression vectorconstruction
分类号
S852.65
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发布时间
2010-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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