换一批罗氏沼虾野田村病毒中国株RT-LAMP-LFD快速检测方法的研究
Rapid Detection of Macrobrachium Rosenbergii Nodavirus Isolated in China by a Reverse-transcription Loop-mediated Isothermal Amplification Assay Combined with a Lateral Flow Dipstick Method
摘要罗氏沼虾白尾病(White tail disease,WTD)是流行于罗氏沼虾苗种阶段的重要疾病,该病病原被确定为罗氏沼虾野田村病毒(Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV),为了建立罗氏沼虾野田村病毒中国分离株(MrNV-chin)的便捷、灵敏、特异的分子诊断方法,本研究根据罗氏沼虾野田村病毒RNA2基因保守序列的6个区域设计了4条特异性引物和1条检测探针,将环介导等温扩增技术与侧向流层析试纸(Lateral flow dipstick,LFD)相结合,建立了MrNV的RT-LAMP-LFD检测方法.结果表明,该方法的灵敏度是常规琼脂糖凝胶电泳的10倍;从核酸提取到检测结果判定仅需45min;反应特异性强,对其他虾类病毒WSSV、IHHNV、IMNV、TSV和YHV扩增结果均为阴性;操作简单,不需要复杂的仪器,在61℃水浴反应即可;利用LFD试纸显示结果,肉眼可直接观察判定.作为一种快速灵敏实用的分子诊断技术,该方法有利于罗氏沼虾白尾病的诊断与预防.
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关键词
罗氏沼虾野田村病毒环介导等温扩增技术侧向流层析试纸Macrobrachium rosenbergii Nodavirus Loop-mediated isothermal amplification Lateral flow dipstick
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2014-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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