换一批肠道病毒68型新型中和试验方法的建立及其初步应用
Development of a Neutralization Test for Enterovirus D68 Using the Enzyme-linked Immunospot Assay
摘要针对肠道病毒68型(EV-D68)建立一种新型快速、高效的中和试验方法,并初步评价其在EV-D68流行病学研究中的应用价值.以灭活EV-D68病毒免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术制备其单克隆抗体;筛选反应性好、特异性强的抗EV-D68单克隆抗体作为检测抗体,基于酶联免疫斑点检测技术(ELISPOT)建立EV-D68高效中和试验方法;进一步比较该方法与传统中和试验方法Nt-CPE的一致性,并使用该方法对临床血清样本进行检测.共获得10株分泌抗EV-D68单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取一株性能最优的15C5进行生产纯化,鉴定其为IgG3亚型;以15C5为检测抗体,建立了快速检测EV-D68中和抗体的Nt-ELISPOT方法;与Nt-CPE方法比较,Nt-ELIS-POT方法将检测时间由5～7d缩短至1d以内,并且两种方法检测结果一致性良好;应用所建立的Nt-ELISPOT方法对厦门地区146份人群血清样本进行检测,显示血清样本EV D68中和抗体阳性率为98.6％(144/146),提示厦门地区可能存在过EV-D68的流行.本研究基于ELISPOT建立的新型EV-D68中和试验方法快速可靠,适合通量检测,可以应用于EV-D68中和抗体水平的血清学调查,为EV-D68感染的防控工作提供帮助.
更多相关知识
关键词
肠道病毒68型(EV-D68)中和试验中和抗体血清检测Enterovirus D68(EV-D68)Neutralization testNeutralizing antibodySeruma diagnosis
分类号
R373.2
栏目名称
发布时间
2017-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31670933）；
题目:手足口病肠道病毒跨血清型广谱中和抗体的表位结构与作用机制研究（81601762）；
国家自然科学基金（2015J05073）；
题目:人补体调节蛋白CD59在水痘-带状疱疹病毒免疫逃逸中的作用研究（31670933）；
福建省自然科学基金（81601762）；
题目:柯萨奇病毒A16型(CA16)广谱中和表位的结构基础（2015J05073）；
National Natural Science Foundation of China（CA16）；
Epitope structure and functional mechanism research of cross serological broadly neutralizing antibodies in enteroviruses of hand-foot-and mouth.National Natural Science Foundation of China； Research on the function of human complement regulatory protein CD59 in VZV immune escape.Fujian Province Natural Science Foundation； Structural basis of broadly neutralizing epitopes of coxsackievirus A16
- 浏览27
- 被引3
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
