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微小RNA-93-5p调控Toll样受体4基因抑制呼吸道合胞病毒感染支气管上皮细胞炎症反应的机制研究

The Mechanism by Which miR-93-5p Regulates the TLR4 Gene to Inhibit the Inflammatory Response of Bronchial Epithelial Cells Infected by Respiratory Syncytial Virus

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摘要研究miR-93-5p调控TLR4基因抑制呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial sirus,RSV)感染支气管上皮细胞炎症反应.培养人支气管上皮细胞16-HBE,RSV感染,实验分为RSV+miR-NC组、RSV+miR-93-5p组、RSV+si-NC 组、RSV+si-TLR4 组、RSV+pcDNA-NC 组、RSV+pcDNA-TLR4 组、RSV+miR-93-5p+pcDNA-NC 组、RSV+miR-93-5p+pcDNA-TLR4组.qRT-PCR评估 miR-93-5p、TLR4 mRNA 表达水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;Western blot检测CyclinD1、P21蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证miR-93-5p对TLR4的靶向调控.与Con组比较,RSV组miR-93-5p表达水平显著降低,TLR4 mRNA表达水平显著增加(P＜0.05).与RSV+miR-NC组比较,RSV+miR-93-5p组16-HBE细胞中miR-93-5p表达水平显著增加,TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低,细胞存活率、CyclinD1蛋白表达显著增加,P21蛋白表达显著降低(P＜0.05).与RSV+si-NC组比较,RSV+si-TLR4组16-HBE细胞中TLR4 mRNA表达水平显著降低,TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低,细胞存活率、CyclinD1蛋白增加,P21蛋白减少(P＜0.05).与RSV+miR-93-5p+pcDNA-NC 组比较,RSV+miR-93-5p+pcDNA-TLR4组 16-HBE 细胞中 TLR4 mRNA 表达水平显著增加,TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著增加,细胞存活率、CyclinD1蛋白表达显著降低,P21蛋白表达显著增加(P＜0.05).miR-93-5p负调控TLR4基因抑制呼吸道合胞病毒感染支气管上皮细胞炎症反应.