中国HIV-1临床分离株感染性假病毒的构建及其中和特征分析

Infectious Pseudovirus Construction and Neutralization Susceptibility Analysis of Clinical Isolates of HIV-1 in China

导出原文传递学术成果认领

摘要本研究从中国人类免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus-1,HIV-1)感染者血浆样本中分离和构建HIV-1 Envelope(Env)感染性假病毒,并分析其对单克隆广谱中和抗体的敏感性.采用逆转录和巢式PCR方法从感染者样本中扩增HIV-1 env基因,利用同源重组方法将env基因克隆至真核表达载体pVAX1中,包装HIV-1 Env假病毒后使用TZM-b1/假病毒中和实验方法检测单克隆广谱中和抗体的中和能力,基于已有抗体的结构数据分析病毒逃逸中和抗体的关键突变位点.本研究从两个HIV-1感染者donor A和donor B中分别获得了 8株和3株携带CRF07 BC亚型env基因的感染性假病毒;序列分析显示两组假病毒Env氨基酸同源性仅为83.2％～85.2％,存在一定的差异;11株假病毒对于VRC01和10E8中和抗体依旧敏感,而对于35O22和VRC34.01耐受;donor B来源的假病毒存在N133D和R170E突变而可能影响了 PG16抗体的中和能力,donor A来源的假病毒可能由于携带了S291F和E336K突变而逃逸了 VRC-PG05抗体,donorA来源的假病毒还可能通过G324E突变进一步影响PGT121中和抗体的活性.本研究成功获得了 11株中国HIV-1 CRF07_BC亚型的Env假病毒,评估了临床分离株病毒对已有中和抗体的敏感性,揭示了病毒逃逸中和抗体的关键突变位点,为中国HIV-1感染者应用单克隆中和抗体治疗提供了选择依据,同时也丰富了 HIV-1假病毒与中和抗体领域的研究.