摘要目的:探究二甲双胍(Metformin)联合γδT细胞对喉癌治疗的效果和机制.方法:细胞实验:体外分离扩增人外周血γδT细胞,将其分为对照组(无Metformin)、低剂量组(3mmol/L的Metform-in)、中剂量组(15mmol/L的Metformin)和高剂量组(75mmol/L的Metformin),检测γδT细胞增殖能力、细胞周期、细胞凋亡情况.取喉癌细胞TU212、喉癌细胞TU686作为靶细胞,收集经Metform-in(浓度为75 mmol/L)作用的γδT细胞作为效应细胞,检测Metformin对γδT细胞的杀伤功能影响.动物实验:喉癌细胞TU212接种于24只裸鼠皮下构建喉癌模型,将其随机分为4组(各组6只),其中空白对照组注射生理盐水,Metformin组单纯使用Metformin治疗,γδT细胞组给予γδT细胞治疗,Metformin+γδT细胞组给予Metformin联合γδT细胞治疗,检测各组裸鼠的肿瘤体积变化情况和PD-L1蛋白表达情况.结果:(1)不同浓度Metformin处理γδT细胞下的细胞增殖率、细胞周期及细胞凋亡情况差异显示出统计学意义(P＜0.05).(2)经过Metformin作用后,γδT细胞对喉癌细胞TU212和喉癌细胞TU686的杀伤能力明显增强,其中γδT细胞:喉癌细胞比为10:1与20:1时杀伤能力差异有统计学意义(P＜0.05).(3)在裸鼠荷瘤实验模型上,单独注射Metformin对喉癌肿瘤组织生长、PD-L1蛋白表达的抑制程度最小,其次为γδT细胞治疗,Metformin联合γδT细胞治疗时对喉癌肿瘤组织的生长、PD-L1蛋白表达抑制程度最大.结论:Metformin联合γδT细胞治疗能够通过抑制PD-L1的表达来调控免疫微环境,促进γδT细胞的增殖和细胞周期,增强γδT细胞对喉癌细胞的杀伤能力,对喉癌治疗具有潜在价值.