降低酶联核酸适配体分析方法中非特异性吸附的分析研究
Methods of reducing non-specific adsorption in an indirect competitive enzyme-linked aptamer assay
摘要以检测蜂蜜中的四环素残留为例,构建间接竞争酶联核酸适体分析法(ic-ELAA),就ic-ELAA中非特异性吸附的影响因素进行分析,探讨降低非特异性吸附的措施.结果表明:选择2 μg/mL四环素-牛血清蛋白在10mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)中过夜包被,次日用0.5 g/mL酪蛋白封闭1h,竞争反应后用6μg/mL链霉亲和素-辣根过氧化物酶催化颜色反应放大竞争效果,最后采用450 nm和630 nm双波长读数,可得到灵敏度为0.035 ng/mL的竞争曲线.同时,根据长期实验经验,提出其他降低非特异性吸附的注意事项.
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