换一批基于磁性Fe3O4粒子的固定化过氧化氢酶的制备及催化性质研究
Preparation and catalytic properties of catalase immobilized on magnetic Fe3O4 particles
摘要采用溶剂热法合成了磁性Fe3 O4粒子,并对其进行Ni2+离子表面修饰,得到Fe3 O4@Ni;通过Fe3 O4@Ni上的Ni2+与过氧化氢酶(CAT)中2×6×His的咪唑基之间的金属螯合作用将CAT固定在Fe3 O4@Ni上,成功制得固定化酶Fe3 O4@Ni-CAT.通过对固定化条件进行优化,CAT的固定化量达到376.13 mg/g,酶活性达到4946 U/g.与游离CAT相比,Fe3 O4@Ni-CAT具有较高的热稳定性和储存稳定性.采用响应面法(RSM)的Box-Behnken设计(BBD)对Fe3 O4@Ni-CAT的催化反应条件进行优化,得到最佳条件:反应温度为40℃,溶液pH为6.4,底物H2 O2的浓度为14.5 mmol/L.在最佳条件下反应2 min,Fe3 O4@Ni-CAT对底物H2 O2的清除率可达84.32％.重复使用10批次后,Fe3 O4@Ni-CAT对H2 O2的清除率仍保持初始H2 O2清除率的69.07％,表明该固定化酶具有良好的可重复利用性.
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