SCF/RGD/SF支架对人牙髓干细胞迁移及分化的影响
Stem cell factor loaded on the RGD/SF scaffolds promotes the proliferation and differentiation of dental pulp stem cells
摘要目的 旨在评估负载在精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(arginine-glycine-aspartic acid,RGD)多肽/丝素蛋白(silk fibroin,SF)支架上的干细胞因子(stem cell factor,SCF)对人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)迁移、增殖、黏附及分化的影响.方法 分离培养人DPSCs,采用细胞划痕实验及CCK-8 法筛选SCF促进DPSCs迁移和增殖的最佳浓度.利用碱性磷酸酶活性、茜素红染色和钙离子浓度,评估SCF对DPSCs早期和晚期成骨矿化水平的影响;通过实时定量聚合酶链式反应检测SCF处理后成牙/成骨相关基因的表达情况,探讨SCF对DPSCs不同时间点成牙/成骨向分化的影响.将SCF负载于RGD/SF支架上,通过CCK-8 法和细胞骨架染色评估RGD及SCF对DPSCs增殖和黏附的影响.结果 SCF促进DPSCs迁移和增殖的最佳浓度为150 ng/mL.150 ng/mL SCF处理DPSCs 5 天后碱性磷酸酶活性显著增强,处理 2 周后茜素红染色矿化结节显著增多、钙离子浓度显著增高,DSPP、DMP1、OCN、OPN、COL1 和RUNX2 基因的表达水平显著升高,提示150 ng/mL SCF具备促进DPSCs早期及晚期成牙/成骨向分化的能力.嫁接RGD多肽可以增强DPSCs在SF支架上的黏附,而负载SCF可促进DPSCs在支架材料上的增殖.结论 SCF可促进DPSCs的迁移、增殖及成牙/成骨向分化,负载在RGD/SF支架上的SCF可增强DPSCs的增殖和黏附,SCF与RGD/SF支架结合可能成为牙髓再生治疗的潜在材料.
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