抗牙龈卟啉单胞菌血凝素2单链抗体的制备与鉴定
Preparation and identification of single chain antibodies against Porphyromonas gingivalis hemagglutinin 2
摘要目的 构建抗牙龈卟啉单胞菌(P.g)血凝素 2(HA2)噬菌体单链抗体(scFv)库,筛选鉴定抗P.g HA2 单链抗体.方法 牙龈卟啉单胞菌重组血凝素 2 免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞提取总RNA,分别扩增鼠IgG重链和轻链可变区,组装scFv基因,导入pcomb3X载体,转化大肠杆菌构建抗P.g HA2 的噬菌体单链抗体库,并进行 4 轮吸附-洗脱-富集筛选单链抗体,对筛选出的单链抗体基因测序并构建单链抗体表达载体诱导表达,SDS-PAGE鉴定抗体,间接ELISA检测抗体亲和力.结果 构建了库容为 7.29×108 pfu抗P.g HA2 单链抗体库,筛选得到 4 株与HA2 结合活性较高的单链抗体.结论 成功制备了抗P.g HA2 单链抗体,为P.g感染的诊断和治疗奠定基础.
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