HPLC和MALDI-TOF-MS法分析重组人钙调磷酸酶B亚基的纯度和肽图谱

PURITY AND PEPTIDE MAPPING DETERMINATION OF RECOMBINANT HUMAN CALCINEURIN B SUBUNIT BY HPLC AND MALDI-TOF-MS

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摘要用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法对重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)的纯度和肽图谱进行了测定,以比较不同批次产品的纯度及其一级结构的一致性,对其进行质量控制.并用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法进行验证.结果表明,运用梯度洗脱RP-HPLC法能对样品进行纯度检查和肽图谱分析,测得3批样品纯度均达到98%以上,肽图谱能达到批间一致.同时用MALDI-TOF-MS法测定,纯度结果二者相符,质谱肽图经计算机辅助分析,确证rhCNB一级结构与天然CNB一致.证明该方法灵敏、准确、可靠.

作者高锦 ^[1] 王艳丽 ^[2] 魏群 ^[3] 学术成果认领

作者单位北京师范大学生化与分子生物学系,100875,北京;沈阳军区联勤部药品仪器检验所,110026,沈阳 ^[1] 北京师范大学生化与分子生物学系,100875,北京 ^[2] 北京师范大学生化与分子生物学系,100875,北京;北京市植物资源研究开发重点实验室,100094,北京 ^[3]

关键词重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)高效液相色谱法基质辅肋激光解吸电离飞行时间质谱法纯度肽图谱

分类号 Q555+7 O657.7+2 O657.63

DOI 10.3321/j.issn:0476-0301.2004.01.022

发布时间 2004-03-12

基金项目

国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划(863计划)