摘要目的：诱导人胚胎干细胞（ human embryonic stem cells，hESCs）定向分化为角质形成细胞K-hESCs（ kerati-nocyte derived from human embryonic stem cells），并分析诱导过程中K-hESCs不同标志物的表达特点。方法：运用含骨形成蛋白4、维甲酸和N2添加剂的上皮分化培养基直接诱导hESCs分化为K-hESCs，通过染色体核型分析检测K-hESCs核型，通过实时定量PCR检测K-hESCs在分化的不同时期基因的表达及其与原代人牙龈上皮细胞（ hu-man gingival epithelial cells，HGECs）、人永生化口腔上皮细胞（ human immortalized oral epithelial cells，HIOECs）、人永生化皮肤角质形成细胞HaCaT的基因表达差异；利用免疫组织化学检测不同标志物在K-hESCs的蛋白表达。结果：运用上皮分化培养基成功地诱导hESCs分化为上皮样细胞K-hESCs；K-hESCs核型具有正常46条染色体，无结构异常；K-hESCs中角质形成细胞标志物基因p63的表达明显低于HaCaT细胞（P＜0．05），而与HGECs和HIOECs中的表达差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论：运用上皮分化培养基可成功诱导hESCs分化为具有正常核型的K-hESCs；标志物的表达特点提示诱导hESCs分化为K-hESCs的过程是从hESCs向单层上皮干细胞分化继而转向复层上皮终末分化发展的趋势，最终得到的K-hESCs类似于单层鳞状上皮干细胞向终末分化初始阶段的角质形成细胞，该阶段的细胞由上皮干细胞静止状态被激活，处于分化初始高增殖活力阶段。