1例成年猛性龋患者龈上菌斑中小韦荣球菌的分离及代谢特性
Isolation,identification,and metabolic characterization of a Veillonella parvula isolated from supragingival plaque in a patient with rampant caries
摘要目的:从成年猛性龋患者健康牙面的龈上菌斑中分离并培养野生株小韦荣球菌(Veillonella parvula,V.parvula),研究其生长及代谢特性,初步探究其与变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)的相互作用.方法:利用韦荣氏球菌琼脂培养基,从成年猛性龋患者健康牙面的龈上菌斑中分离并纯化野生株V.parvula,进行形态、生化和16S rRNA基因鉴定.取标准株V.parvula作为对照组,用添加120 mmol/L乳酸的脑心浸出液肉汤(brain heart infusion broth,BHI)培养基在厌氧箱内分别培养野生株V.parvula和标准株V.parvula,检测24 h内野生株V.parvula和标准株V.parvula生长状况及乳酸代谢能力.将野生株V.parvula和标准株V.parvula分别与S.mu-tans 进行共培养,检测培养基内乳酸浓度及pH值,用扫描电镜观察细菌生物膜的结构,结晶紫染色后对细菌生物膜形成量进行半定量分析,初步探索两者之间的互相作用关系.结 果:经生化鉴定及16S rRNA基因鉴定,从成年猛性龋患者健康牙面的龈上菌斑中分离出1株野生株V.parvula.24 h内对野生株V.parvula及标准株V.parvula进行培养,两者生长曲线与培养基内剩余乳酸浓度随时间变化趋势不同,二者之间的差异有统计学意义(F=10.431,P<0.001;F=5.641,P<0.05);将野生株 V.parvula和标准株 V.parvula 分别与 S.mutans 共培养,12 h时野生株V.parvula与S.mutans共培养组形成的细菌生物膜结构比标准株V.parvula与S.mutans共培养组更为致密、生物膜量更多(P<0.001).24 h时野生株V.parvula与S.mutans共培养组产生的乳酸累积浓度高达65 mmol/L,显著高于标准株V.parvula与S.mutans共培养组和S.mutans单培养组(P<0.001).结论:利用韦荣氏球菌琼脂培养基能够成功从成年猛性龋患者健康牙面的龈上菌斑中分离野生株V.panula,其生长能力、乳酸代谢能力及促进S.mutans形成生物膜和产酸能力均高于标准株V.parvula,能够加速早期龋的形成.
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