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一贯煎对肝星状细胞增殖、活化的影响及机制

Effect and mechanism of Yiguanjian on proliferation and activation of hepatic stellate cells

摘要目的 基于Wnt/β-catenin信号通路探究一贯煎抑制肝星状细胞增殖的机制.方法 MTT实验测定四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝星状细胞(HSC-T6)活化的最佳浓度,及一贯煎的药物最佳干预浓度,将细胞分为正常对照组、模型组及一贯煎低、中、高剂量组,采用不同浓度一贯煎冻干粉对活化后HSC-T6进行干预,MTT法测定各组HSC-T6细胞增殖抑制率,倒置显微镜下观察细胞形态,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组HSC-T6细胞中活化相关蛋白Col-1、α-SMA mRNA表达,Western boltting法检测各组HSC-T6细胞中Col-1、α-SMA蛋白及Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白Wnt1、β-catenin、GSK-3β的表达.结果 6 mmol/L CCl4刺激HSC-T6细胞24 h后增殖率最高,因此用6 mmol/L作为最佳实验浓度.与正常对照组比较,2 000、4 000 μg/mL一贯煎干预后细胞活力均低(P<0.05),故选择500、1 000、1 500 μg/mL为一贯煎的实验浓度.与正常对照组比较,模型组干预24 h细胞增殖抑制率低(P<0.05);与模型组比较,一贯煎低、中、高剂量组干预24 h细胞增殖抑制率均高(P<0.05).一贯煎低、中、高剂量组细胞较正常对照组及模型组细胞出现不同程度密度降低,胞核皱缩、变圆等形态改变.与正常对照组比较,模型组Col-1、α-SMA mRNA相对表达量高(P<0.05);与模型组比较,一贯煎低、中、高剂量组Col-1、α-SMA mRNA相对表达量低(P<0.05),且一贯煎高剂量组Col-1、α-SMA mRNA相对表达量较一贯煎低、中剂量组低(P<0.05).与正常对照组比较,模型组Col-1、α-SMA蛋白相对表达量高(P<0.05);与模型组比较,一贯煎低、中剂量组Col-1蛋白相对表达量及一贯煎低、中、高剂量组α-SMA蛋白相对表达量低(P<0.05),其中一贯煎高剂量组Col-1蛋白相对表达量较一贯煎低、中剂量组高,α-SMA蛋白相对表达量较一贯煎低、中剂量组低(P<0.05).与正常对照组比较,模型组Wnt1蛋白相对表达量高,GSK-3β、β-catenin蛋白相对表达量低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,一贯煎低、中、高剂量组Wnt1、β-catenin蛋白相对表达量低,GSK-3β蛋白相对表达量高,差异有统计学意义(P<0.05),其中一贯煎高剂量组Wnt1、β-catenin蛋白相对表达量较一贯煎低、中剂量组低,GSK-3β蛋白相对表达量较一贯煎低、中剂量组高(P<0.05).结论 一贯煎能够有效抑制肝星状细胞增殖,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活有关.

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栏目名称 实验研究
DOI 10.16025/j.1674-1307.2025.01.013
发布时间 2025-02-21
基金项目
国家自然科学基金 北京市中医药科技发展资金项目 北京市中医药科技发展资金项目 北京市中医药研究所市财政专项课题 北京市中医药研究所市财政专项课题
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