荆银双解散基于PI3K/AKT信号通路治疗甲型流感病毒感染小鼠的作用机制研究
Mechanism of Jingyin Shuangjie Powder in the treatment of influenza A virus-infected mice based on PI3K/AKT signaling pathway
摘要目的 基于脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)信号通路探讨荆银双解散治疗甲型流感病毒感染小鼠的作用机制.方法 将96只小鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、西药组和中药组,各24只,进行药效学研究;另选25只小鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、中药组、通路激动剂组、通路激动剂联合中药组,各5只,进行机制研究.除空白组外,其他各组建立流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株PR8感染小鼠模型,中药组予荆银双解散3 mg/(g·d)灌胃,西药组予磷酸奥司他韦22.75 mg/(kg·d)灌胃,通路激动剂组予胰岛素样生长因子-1(IGF-1)50 μg/(kg·d)腹腔注射,通路激动剂联合中药组予IGF-1 50 μg/(kg·d)腹腔注射+荆银双解散3 mg/(g·d)灌胃,1次/d.药效学研究中,比较连续给药1、3、5 d时,各组小鼠一般情况、肺指数与肺指数抑制率、肺组织病理变化,ELISA法检测各组肺组织IL-6、IL-10、IFN-γ水平;机制研究中,连续给药5 d,Western blotting法检测各组肺组织PI3K、p-AKT、AKT、NF-κB p65蛋白相对表达量,RT-qPCR法检测各组PI3K、AKT、NF-κB p65 mRNA表达量.结果 与模型组比较,中药组小鼠一般状态较好,体质量、饮食量较多,给药第3、5天肺指数低(P<0.05),肺组织炎性浸润和红细胞渗出轻.与模型组比较,中药组第3天肺组织IL-6相对表达量低(P<0.05)、IL-10相对表达量高(P<0.05),给药第3、第5天肺组织IFN-γ相对表达量低(P<0.05).与模型组比较,中药组PI3K、p-AKT/AKT、NF-κB p65蛋白相对表达量低(P<0.05),PI3K、AKT、NF-κB mRNA相对表达量低(P<0.05);与中药组比较,通路激动剂联合中药组PI3K、p-AKT/AKT、NF-κB p65蛋白和PI3K、AKT、NF-κB p65 mRNA相对表达量高(P<0.05).结论 荆银双解散能够改善甲型流感病毒感染小鼠一般情况,降低小鼠肺指数,改善细胞因子表达及小鼠肺部病理损伤,其作用机制可能为下调PI3K/AKT信号通路关键蛋白和基因表达.
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