摘要目的 探讨无毒干蟾及蟾酥提取物的体外抗甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)的作用及机制.方法 制备无毒干蟾水提物、无毒干蟾醇提物、蟾酥水提物、蟾酥醇提物以及磷酸奥司他韦的稀释液,同时设置空白组、病毒组,以感染流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株A/PR/8/34(H1N1)的犬肾(MDCK)细胞为载体,细胞活力检测(CCK8)法测定药物对MDCK细胞的最大无毒浓度(TC0)及半数中毒浓度(TC50),检测在不同浓度的各药物作用下PR8诱导后的细胞存活率、抗IAV的有效率(ER)、半数有效浓度(EC50)和治疗指数(TI).选择ER和TI较高者对应的治疗方式,分别在处理后12、24、48 h,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR(qPCR)法检测内质网应激通路相关基因及凋亡基因的表达.结果 无毒干蟾水提物、无毒干蟾醇提物、蟾酥水提物、蟾酥醇提物对MDCK细胞的TC0分别为39.06、195.31、1.22、4.88 mg/L,TC50分别为4 191.40、2 573.90、19.12、59.49 mg/L.各药物在3种给药方式下均有一定的体外抗IAV作用,并呈现出浓度依赖性,以直接灭活作用方式下的中药提取物体外抗IAV的ER、TI最高;给药后12、24、48 h,蟾酥水提物组的细胞凋亡率均低于其余3组中药提取物组;与病毒组比较,无毒干蟾醇提物、蟾酥水提物均能明显下调IAV感染后细胞的葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/Ebp-同源蛋白质(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-12(Caspase-12)、Caspase-3,上调B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA表达.结论 无毒干蟾水提物、无毒干蟾醇提物、蟾酥水提物、蟾酥醇提物均对IAV有直接灭活作用,无毒干蟾醇提物、蟾酥水提物的抗病毒机制可能与其抑制内质网应激,诱导细胞凋亡有关.