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二陈汤对血脂异常痰浊阻遏证小鼠PHGDH甲基化及其介导的丝氨酸代谢信号通路的影响

Effects of Erchen Decoction on PHGDH methylation and the PHGDH-mediated serine metabolism signaling pathway in mice with dyslipidemia of the phlegm-dampness obstruction syndrome

摘要目的 观察二陈汤对血脂异常痰浊阻遏证小鼠3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)甲基化及其介导的丝氨酸代谢信号通路的影响.方法 将C57BL/6J小鼠作为正常组,取ApoE基因敲除小鼠20只制备血脂异常痰浊阻遏证模型,取5只制备血脂异常脾肾阳虚证模型.造模成功后,用随机数字表法将ApoE基因敲除小鼠分为模型组、方证相应低剂量组、方证相应中剂量组、方证相应高剂量组、方证不相应组,每组各5只.方证相应低、中、高剂量组分别给予二陈汤4.45、8.90、17.8 g/(kg·d)灌胃;方证不相应组给予二陈汤8.90 g/(kg·d)灌胃;正常组、模型组给予相同体积的生理盐水灌胃.均每天灌胃1次,共4周.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清PHGDH水平,甲基化敏感限制性内切酶聚合酶链反应(MSRE-PCR)检测主动脉PHGDH基因甲基化水平,逆转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测主动脉PHGDH mRNA表达水平,液相色谱-质谱联用(LC-MS)法检测血清丝氨酸代谢通路关键代谢物水平.结果 与正常组比较,模型组小鼠PHGDH基因甲基化水平高,PHGDH mRNA表达、血清PHGDH水平低(P<0.05);与模型组比较,方证相应中剂量组PHGDH基因甲基化水平低,PHGDH mRNA表达、血清PHGDH水平、丝氨酸、苏氨酸水平高(P<0.05);与方证相应中剂量组比较,方证不相应组PHGDH基因甲基化水平高,PHGDH mRNA表达、血清PHGDH水平、丝氨酸、苏氨酸水平低(P<0.05).结论 二陈汤可抑制血脂异常痰浊阻遏证小鼠主动脉PHGDH基因甲基化,从而提高PHGDH基因表达水平,降低氧化应激,激活丝氨酸代谢通路.

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