补肾法对控制性超促排小鼠卵丘扩展分级及相关因子HAS2、TNFAIP6的影响

Effects of kidney-invigorating method on the levels of cumulus expansion, HAS2 and TNFAIP6 in controlled ovarian hyperstimulation mice

二维码有效期 120s

摘要目的研究补肾调经Ⅱ号方、Ⅲ号方序贯给药对小鼠卵丘卵母细胞复合物(COCs)卵丘扩展分级情况及卵丘扩展相关因子透明质酸合成酶2(HAS2)、肿瘤坏死因子α刺激因子-6(TNFAIP6)表达的影响.方法将120小鼠随机分为正常组、模型组、补肾组.模型组、补肾组第1～9天腹腔注射醋酸丙氨瑞林(GnRHa),第9天同时注射血清促性腺激素(PMSG),48 h后注射绒毛膜促性腺激素(hCG),正常组注射等体积生理盐水;补肾组第1～9天灌胃补肾调经Ⅱ号方,第10～11天灌胃补肾调经Ⅲ号方,正常组与模型组灌胃等体积蒸馏水.注射生理盐水或hCG 6、9、12 h后在体式显微镜下取出卵丘卵母细胞复合物(COCs),观察卵丘扩展分级并计数,收集COCs,免疫荧光染色、实时荧光定量PCR检测卵丘扩展相关因子蛋白及mRNA的表达.结果与正常组相比,模型组的卵丘扩展分级情况及卵丘扩展相关因子的mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与正常组和模型组相比,补肾组的卵丘扩展分级呈现低级别扩展率降低、高级别扩展率升高的特点(P<0.05);注射生理盐水或hCG 6 h,正常组、模型组和补肾组3组间HAS2 mRNA的表达水平差异无统计学意义(P>0.05);注射生理盐水或hCG 9、12 h,与正常组和模型组相比,补肾组HAS2 mRNA的表达水平升高(P<0.05);注射生理盐水或hCG 6、9、12 h,补肾组TNFAIP6 mRNA的表达水平升高(P<0.05).结论补肾调经Ⅱ号方、Ⅲ号方序贯给药可促进小鼠COCs的卵丘扩展,推测其可能的机制与上调卵丘扩展相关因子HAS2、TNFAIP6 mRNA的表达有关.