摘要目的 基于肠道菌群和活性氧(ROS)/硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)信号通路探究芪参益气滴丸对慢性心力衰竭(CHF)大鼠的调节作用及其相关机制.方法 SPF级雄性SD大鼠 65 只,采用皮下多点注射异丙肾上腺素复合力竭及控食方法制备CHF模型,将造模成功大鼠按随机数字表法分为模型组、卡托普利组(5.30 mg/kg)和芪参益气低、中、高剂量组(0.08、0.16、0.32 g/kg),每组 11 只,另设空白组7 只,给药组分别予相应药物灌胃,空白组和模型组灌胃等量纯净水,连续4 周.经胸超声检测大鼠心功能;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清脑钠素(BNP)和脂多糖(LPS)、白细胞介素-18(IL-18)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平,全自动生化分析仪检测肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理变化;流式细胞仪检测心肌ROS 水平;免疫组化检测心肌组织 TXNIP 及 NLRP3 的表达;实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹法(Western blotting)检测心肌 TXNIP、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)和IL-1β的mRNA和蛋白表达,同时Western blotting检测心肌硫氧还蛋白(Trx)和结肠紧密连接蛋白(ZO-1)、闭合蛋白(occludin)和密封蛋白5(claudin-5)的表达;最后利用16S rDNA高通量测序技术测定空白组、模型组及芪参益气高剂量组大鼠肠道微生物群的差异.结果 与空白组比较,模型组大鼠左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)明显降低(P<0.01);血清BNP、IL-18、IL-1β和LPS水平明显增加(P<0.01),CK、LDH和CK-MB含量明显升高(P<0.01);心肌组织可见纤维水肿,呈波浪状,胞质疏松,可见圆形空泡变性,局部组织可见纤维溶解,被增生的结缔组织取代,伴有炎性细胞浸润;心肌ROS水平明显升高(P<0.01);心肌TXNIP及NLRP3 的表达明显增加(P<0.01);TXNIP、NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β的mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.05,P<0.01),而Trx、ZO-1、occludin、claudin-5 表达均明显降低(P<0.01).与模型组比较,芪参益气高剂量组变化最明显,其LVEF和LVFS明显升高(P<0.01);血清BNP、IL-18、IL-1β和LPS水平明显降低(P<0.01),CK、LDH和CK-MB含量明显减少(P<0.01);心肌组织损伤有改善;心肌ROS水平明显降低(P<0.01);心肌TXNIP 及NLRP3 的表达明显减少(P<0.01);TXNIP、NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β的mRNA和蛋白表达均明显减少(P<0.05,P<0.01),而Trx、ZO-1、occludin、claudin-5 表达均明显升高(P<0.01).16S rDNA测序结果证实:造模和药物干预后大鼠肠道菌群物种都发生改变,菌群的ɑ和β多样性也存在明显差异;与空白组比较,物种差异在科水平上,颤螺菌科(Oscillospiraceae)的丰度下调(P<0.05),乳杆菌科(Lactobacillaceae)的丰度上调,在种水平上,普雷沃菌(Segatella copri)和琥珀酸密螺旋体菌(Treponema succinifaciens)的丰度上调,Kineothrix alysoides(P<0.05)、伶俐瘤胃球菌(Ruminococcus callidus)和提摩普杆菌(Prevotellamassilia timonensis)的丰度下调;与模型组比较,在科水平上,芪参益气高剂量组的Oscillospiraceae上调(P<0.05),Lactobacillaceae 则下调,在种水平上,Segatella copri 和 Treponema succinifaciens菌的丰度下调,Kineothrix alysoides菌的丰度上调(P<0.05).结论 芪参益气滴丸能调节肠道共生菌Kineothrix alysoides的相对丰度,降低血清 LPS水平,抑制ROS/TXNIP/NLRP3 信号通路,改善炎症反应,从而发挥治疗CHF的作用.