摘要目的 构建符合中医证候特征的扩张型心肌病(DCM)心力衰竭(简称"心衰")毒证病证结合动物模型,并鉴定DCM心衰毒证的潜在生物标志物或干预靶点.方法 15只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、阿霉素组、DCM心衰毒证组,每组5只.阿霉素组腹腔注射阿霉素1.25mg/kg,于每周第1、4天注射,给予普通饮食;DCM心衰毒证组在阿霉素组基础上给予42％白酒(10 mL/kg)隔天灌胃、45％高脂饲料,饮用10％果糖溶液;空白对照组腹腔注射等体积磷酸盐缓冲液(注射时间同阿霉素组),给予普通饮食.造模10周.造模第4、10周,使用超声心动仪检测心脏左室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS)、收缩期左室后壁厚度(LVPWs)、舒张期左室后壁厚度、收缩期左室内径(LVIDs)、舒张期左室内径(LVIDd),红绿蓝比色法评估大鼠宏观被毛色泽变化;造模结束后,旷场实验评估大鼠运动耐量,抓力测试评估大鼠前肢抓力变化,苏木精-伊红染色、Masson染色、小麦胚芽凝集素染色评估心脏组织病理变化.采用Bulk RNA测序分析鉴定空白对照组与DCM心衰毒证组大鼠心脏的差异表达基因(DEGs),以DCM、大鼠被毛色泽蓝色(Blue)值和前肢抓力作为表型特征,通过加权共表达网络分析(WGCNA)筛选DCM心衰毒证特征模块基因集(MEs).将DEGs、免疫相关基因集、MEs进行重叠分析,交集基因即DCM心衰毒证的潜在生物标志物或干预靶点,并利用接受者操作特征(ROC)曲线评估其敏感性和特异性.结果 与空白对照组比较,造模第10周,阿霉素组和DCM心衰毒证组大鼠LVEF、FS、LVPWs降低,LVIDs、LVIDd增加,旷场实验运动距离缩短,前肢抓力降低(P＜0.05).造模第10周,与空白对照组和阿霉素组比较,DCM心衰毒证组大鼠被毛色泽Blue值降低(P＜0.05).与空白对照组比较,阿霉素组和DCM心衰毒证组大鼠心脏明显扩张,心脏组织免疫细胞浸润增加,并伴有胶原沉积、心肌细胞肥大.Bulk RNA测序鉴定得2 003个DEGs,其中1 082个基因下调、921个基因上调.WGCNA结果发现,MEturquoise模块与DCM正相关性最强,与Blue值及前肢抓力负相关性最强.重叠分析鉴定出4个交集基因,即骨形态发生蛋白6(Bmp6)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Pak1)、原癌基因JunD和S100钙结合蛋白A3(S100A3).ROC曲线分析表明,以上4个基因对于DCM心衰毒证具有高度敏感性和特异性.结论 阿霉素腹腔注射叠加高脂饲料、果糖饮水及白酒灌胃构建的大鼠模型更符合DCM心衰毒证的特征.Bmp6、JunD、Pak1、S100A3是DCM心衰毒证的潜在生物标志物或靶点.