电针调控ILC3s/IL-22通路改善炎症性肠病小鼠结肠损伤的机制研究
Mechanism of electroacupuncture ameliorating colonic injury in mice with inflammatory bowel disease via the ILC3s/IL-22 pathway
摘要目的 观察电针"足三里"对炎症性肠病(IBD)小鼠结肠中分泌白细胞介素(IL)-22的3型固有淋巴细胞(ILC3s)和肠胆碱能神经元等的影响,探讨电针改善IBD的效应机制.方法 24只C57BL/6J雄性小鼠按照随机数字表法分为正常组(n=8)和造模组(n=16).造模组小鼠给予4%硫酸葡聚糖钠盐水溶液自由饮用7 d,制备IBD小鼠模型.造模后第4天,将造模组小鼠按随机数字表法分为模型组和电针组,每组8只.对电针组小鼠双侧"足三里"行电针干预,每日1次,每次20 min,连续7 d.干预结束后,观察各组小鼠粪便,检测粪便隐血情况;对各组小鼠疾病活动指数(DAI)进行评分;测定结肠长度;苏木精-伊红染色法观察小鼠结肠组织形态,并进行组织病理学评分;流式多重蛋白定量检测结肠组织中IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6的含量;流式细胞术检测结肠组织固有层淋巴细胞IL-22+ILC3 s比例;酶联免疫吸附测定法检测结肠组织中IL-22含量;免疫荧光法检测结肠组织中乙酰胆碱转移酶(ChAT)+/原癌基因Fos(c-Fos)+共标神经元数量.结果 与正常组比较,模型组小鼠出现不同程度的稀便,粪便隐血试验呈强阳性,DAI评分升高,结肠长度缩短,结肠组织病理学评分增加,结肠组织中IL-1β、TNF-α和IL-6含量增加,结肠组织固有层淋巴细胞中IL-22+ILC3s比例减少(P<0.05).与模型组比较,电针组小鼠粪便性状得到改善,粪便隐血试验呈弱阳性,DAI评分降低,结肠长度增加,结肠组织病理学评分减少,结肠组织中IL-1β、TNF-α和IL-6含量降低,结肠组织固有层淋巴细胞中IL-22+ILC3s比例增加,结肠组织IL-22含量升高,结肠组织ChAT+/c-Fos+共标神经元数量增多(P<0.05).结论 电针"足三里"能够明显改善IBD小鼠结肠损伤,降低炎症反应,其机制可能与激活肠胆碱能神经元、增强结肠ILC3s功能有关.
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