摘要目的 探讨参知健脑方对脑小血管病性认知障碍的作用及机制.方法 动物实验中,采用随机数字表法将57 只SPF级雄性SD大鼠分为假手术组、造模组、参知健脑方组(2.21g/kg)各15 只及盐酸美金刚组(2.1mg/kg)12 只.假手术组行假手术,其余各组采用双侧颈总动脉永久性结扎术制备脑小血管病大鼠模型.各给药组灌胃相应剂量药物,假手术组和造模组予等体积无菌反渗透水灌胃,每日1 次,连续4 周.采用莫里斯水迷宫实验评估大鼠认知功能;HE染色和尼氏染色观察大鼠海马CA1 区病理形态;免疫荧光法检测大鼠海马CA1 区整合素αM(CD11b)、离子钙结合衔接分子1(IBA-1)荧光表达;酶联免疫吸附测定法检测大鼠海马组织和血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;蛋白质印迹法和荧光定量PCR法检测大鼠海马组织神经源位点缺口同源蛋白1(Notch1)、重组信号结合蛋白Jκ(RBP-Jκ)、发状分裂相关增强子-1(HES-1)蛋白及mRNA表达.细胞实验中,采用氧糖剥夺/再灌注法及条件培养基共培养法构建BV2及Bend.3 细胞共培养模型,设BV2/Bend.3-正常1 组,BV2/Bend.3-模型1 组,BV2/Bend.3-盐酸美金刚组(10 μmol/L),BV2/Bend.3-参知健脑方低、中、高剂量组(0.025、0.050、0.100 g/L);细胞回复实验采用Notch1 过表达慢病毒转染BV2 细胞,再进行造模与共培养,设BV2/Bend.3-正常2 组、BV2/Bend.3-模型2 组、BV2/Bend.3-Notch1 过表达组、BV2/Bend.3-阴性对照组、BV2/Bend.3-参知健脑方组(0.050 g/L)、BV2/Bend.3-Notch1 过表达+参知健脑方组(0.050 g/L);正常组、模型组不予干预,各给药组加入相应药物进行培养.采用免疫荧光法检测BV2 细胞CD11b、IBA-1 荧光表达;酶联免疫吸附测定法检测Bend.3 细胞IL-6、IL-1β、TNF-α含量;蛋白质印迹法和荧光定量PCR法检测BV2 细胞Notch1、RBP-Jκ、HES-1蛋白及mRNA表达.结果 动物实验中,与假手术组比较,造模组大鼠逃避潜伏期延长、穿越平台次数及目标象限停留时间百分比降低,海马CA1 区神经元损伤,CD11b、IBA-1 平均荧光强度升高,IL-6、IL-1β、TNF-α 含量升高,Notch1、RBP-Jκ、HES-1 蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);参知健脑方干预后,上述病理改变得到改善(P<0.05).细胞实验中,与BV2-正常 1 组比较,BV2-模型 1 组细胞 CD11b、IBA-1 平均荧光强度升高,Notch1、RBP-Jκ、HES-1 蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);与Bend.3-正常 1 组比较,Bend.3-模型 1 组细胞IL-6、IL-1β、TNF-α含量升高(P<0.05);参知健脑方中剂量及盐酸美金刚干预后,上述病理改变得到改善(P<0.05).细胞回复实验中,与BV2-正常2 组比较,BV2-模型2 组及BV2-Notch1 过表达组细胞CD11b、IBA-1 平均荧光强度升高,Notch1、RBP-Jκ、HES-1 蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);与Bend.3-正常2 组比较,Bend.3-模型2 组及Bend.3-Notch1 过表达组细胞IL-6、IL-1β、TNF-α含量升高(P<0.05).参知健脑方干预后,上述病理改变得到改善(P<0.05).结论 参知健脑方可能通过下调Notch1/RBP-Jκ/HES-1 信号通路,抑制小胶质细胞激活,减轻炎症反应,保护神经血管单元,改善脑小血管病性认知障碍.