电针"次髎"通过促进内源性骨髓间充质干细胞归巢改善小鼠压力性尿失禁的研究
Study on electroacupuncture at"Ciliao"(BL32)improving stress urinary incontinence in mice by promoting endogenous bone marrow mesenchymal stem cell homing
摘要目的 探讨电针小鼠"次髎"是否通过促进内源性骨髓间充质干细胞(BMMSC)向尿道周边归巢,从而改善小鼠尿道周边组织线粒体稳态失衡,最终改善小鼠压力性尿失禁(SUI),为治疗盆底功能障碍性疾病提供参考.方法 实验一,将25 只 C57BL/6 雌性小鼠任意分为假手术组、模型组、电针组、针刺组、电刺激组,每组 5 只.基于实验一电针组指标改善程度最大,进行实验二,另15 只 C57BL/6 雌性小鼠任意分为模型组、电针组、电针+ADM3100 组,每组5 只.假手术组仅将导管置于小鼠阴道内,不进行球囊注射扩张;其他各组小鼠采用阴道扩张法构建 SUI 模型.实验一:假手术组、模型组不进行任何干预,电针组电针刺激小鼠"次髎",针刺组仅针刺"次髎",电刺激组将电极片贴于"次髎"处.实验二:模型组不进行任何干预;电针+ADM3100 组第 1 次干预前 24 h于尿道周边注射 ADM3100 溶液,电针"次髎";电针组第1 次干预前24 h 于尿道周边注射等体积磷酸盐缓冲液,电针"次髎".每次干预20 min,每日1 次,连续7 d.干预结束后,采用改良的模拟人类尿道膀胱插管法记录小鼠膀胱漏尿点压(BLPP)、腹压漏尿点压(ALPP);Masson 染色检测尿道周边组织胶原沉积情况;萤光素酶发光法检测尿道周边组织线粒体三磷酸腺苷(ATP)含量;免疫荧光染色法检测尿道周边组织 BMMSC 归巢;JC-1 染色法检测尿道周边组织线粒体膜电位;荧光探针DCFH-DA 法检测尿道周边组织活性氧(ROS)表达;实时荧光 PCR 法检测尿道周边组织基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)mRNA 表达.结果 实验一:与假手术组比较,模型组小鼠 BLPP、ALPP 下降(P<0.05);尿道周边组织胶原纤维蓝色变浅,分布紊乱,沉积减少;尿道周边组织胶原容积分数、线粒体膜电位及线粒体 ATP 含量降低,ROS 表达增加(P<0.05).与模型组比较,电针组、针刺组、电刺激组小鼠 BLPP、ALPP 升高(P<0.05);尿道周边组织胶原纤维蓝色加深,分布紊乱减轻,沉积增多;尿道周边组织胶原容积分数、BMMSC 比例、线粒体膜电位、线粒体 ATP 含量、SDF-1α mRNA表达增加,ROS 表达减少(P<0.05).与电针组比较,针刺组、电刺激组小鼠 BLPP、ALPP 下降(P<0.05);尿道周边组织胶原容积分数、BMMSC 比例、线粒体膜电位、线粒体ATP 含量、SDF-1α mRNA表达降低,ROS 表达增加(P<0.05).实验二:与电针组比较,电针+ADM3100 组小鼠 BLPP、ALPP下降(P<0.05);尿道周边组织胶原容积分数、BMMSC 比例、线粒体膜电位、线粒体 ATP 含量、SDF-1α mRNA 表达降低,ROS 表达增加(P<0.05).结论 电针"次髎"可能通过促进 SUI 小鼠内源性 BMMSC 归巢改善尿道周边组织线粒体稳态失衡,进而改善小鼠 SUI.
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