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N-V蛋白酶含量检测方法的准确度评价

Evaluation on accuracy of concentration testing method for N-V proltein

摘要目的:采用多种方法测定N-V蛋白酶含量,并比较实验结果,选择出最适合N-V蛋白酶含量测定的方法.方法:从沙蚕体内提取的N-V蛋白酶,以凯氏定氮法为基准方法,采用考马斯亮蓝法、Lowry法和紫外吸收法测定N-V蛋白酶的含量.结果:考马斯亮蓝法得到N-V蛋白酶含量为(5.150±0.028)g·L-1,紫外吸收法(A280-A260)测得蛋白酶含量为(5.202 ±0.001)g·L-1,这两种方法均与凯氏定氮法测得的结果(5.164±0.013)g·L-1存在较小差异;Lowry法测得的结果为(1.12±0.014)g·L-1,明显偏低,存在较大差异.结论:凯氏定氮法、考马斯亮蓝法和紫外吸收法(A280-A260)均可测定出N-V蛋白酶含量.但N-V蛋白酶不适合采用Lowry法进行测定.

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