刺五加叶皂苷B对过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用

Inhibitory effects of Ciwujianoside B on apoptosis induced by hydrogen peroxide in neonatal rat cardiomyocytes

导出 OA 学术成果认领

摘要目的:探讨刺王加叶皂苷B(C-B)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响,阐明其对氧化应激损伤所致的心肌细胞凋亡的抑制作用.方法:乳鼠心肌细胞行原代培养,取自主搏动良好的心肌细胞随机分为正常对照组、H_2O_2)损伤组(200μmol·L~(-1)H_2O_2诱导心肌细胞凋亡)、100 mg·L~(-1)C-B组和200 mg·L~(-1)C-B组,倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活率,Annexin V-FITC流式细胞术检测凋亡率,分光光度法检测Caspase-3活性,免疫印迹法检测细胞Caspase-3、PARP、Bcl-2和Bax蛋白表达.结果:与正常对照组比较,200μmol·L~(-1)H_2O_2组心肌细胞有损伤性改变,细胞存活率明显降低(P<0.001),凋亡率升高(P<0.001),Caspase-3活性增加(P<0.01),细胞Bcl-2蛋白表达减少,Caspase-3及Bax蛋白表达增多,PARP蛋白降解增多.与H_2O_2损伤组比较,100及200 mg·L~(-1)C-B组心肌细胞损伤性改变均减轻,细胞存活率增加(P<0.05或P<0.01),凋亡率降低(P<0.001),Caspase-3活性降低(P<0.05或P<0.01),细胞Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达和Caspase-3蛋白表达减少,PARP蛋白降解减少(依据电泳条带的宽窄及明暗度判断蛋白表达程度),且200 mg·L~(-1)C-B组的作用更明显.结论:C-B对H_2O_2诱导的心肌细胞凋亡有一定的抑制作用,可能与其调节细胞内凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2,Bax的表达有关.