换一批蜱传森林脑炎病毒非结构蛋白1原核表达载体的构建
Construction of prokaryotic expression vector of nonstructural protein 1 of Tick-borne encephalitis virus
摘要目的:构建蜱传森林脑炎病毒(TBEV)非结构蛋白1(NS1)的原核表达载体,以期获得其高纯度的表达,为制备多克隆抗体及其功能的研究奠定实验基础.方法:根据目的基因序列设计PCR引物,利用基因重组技术构建原核表达载体pEASYTM-E1-NS1.将重组后质粒pEASYTM-E1-NS1转化至BL21细胞,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后进行镍离子亲和纯化,利用Bradford法测定蛋白浓度.采用SDS-PAGE和Westernblotting法分析融合蛋白的表达水平.结果:含TBEV NS1的原核表达载体pEASYTM-E1-NS1经诱导后,可获得以包涵体形式存在的融合蛋白,通过亲和纯化得到较高纯度的蛋白质.SDS-PAGE和Western blotting,在相对分子质量约40 000处有特异性蛋白条带.结论:成功构建重组pEASYTM-E1-NS1原核表达载体,获得高纯度的重组TBEV NS1的融合蛋白.
更多相关知识
栏目名称
DOI
10.7694/jldxyxb20130341
发布时间
2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金资助课题（(69301261)）
- 浏览176
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
