鹿茸多肽介导心肌干细胞分化对终末心肌分化基因ANP和MLC-2v表达的影响

Effect of differentiation of cardiac stem cells mediated by pilose antler polypeptides on expressions of terminal myocardial differentiation genes ANP and MLC-2v

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摘要目的:探讨鹿茸多肽介导心肌干细胞(CSC)分化对终末心肌分化基因心房钠尿肽(ANP)和心肌肌凝蛋白轻链2(MLC-2v)表达的影响,阐明其修复受损心肌的作用机制.方法:选取出生2 d的雄性 Wistar大鼠,提取CSC,免疫荧光鉴定CSC表面标志物c-Kit,流式细胞术鉴定CSC纯度.以培养皿为实验单位,分为空白对照组(加等量缓冲液)、5-氮胞苷组(终浓度3 μmol·L-1)、鹿茸多肽组(终浓度800 mg·L-1)和联合组(3 μmol·L-15-氮胞苷+800 mg·L-1鹿茸多肽),于37℃、5% CO2培养箱中培养48 h.ELISA法检测各组细胞上清液中 ANP 和 MLC-2v 表达水平,RT-PCR 法检测各组细胞中 ANP 和 MLC-2v mRNA 表达水平.结果:获得纯度>95%的CSC.ELISA法检测,与空白对照组比较,5-氮胞苷组、鹿茸多肽组和联合组细胞上清中 ANP和 MLC-2v表达水平明显升高(P<0.05);联合组 ANP和 MLC-2v表达水平高于5-氮胞苷组和鹿茸多肽组,但差异无统计学意义(P>0.05).RT-PCR法检测,与空白对照组比较,5-氮胞苷组、鹿茸多肽组和联合组 ANP和 MLC-2v mRNA表达水平明显升高(P<0.05).结论:鹿茸多肽可以通过增强心肌分化基因ANP和 MLC-2v表达介导CSC分化为心肌细胞,且在一定程度上减轻5-氮胞苷所致的细胞毒性.