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人口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞过表达WWOX基因的基因表达谱分析及WWOX基因的抑癌作用机制

Analysis on gene profile of over-expression WWOX gene in human oral squamous cell carcinoma Tca8113 cells and tumor inhibition mechanism of WWOX gene

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摘要目的:分析人口腔鳞状细胞癌(OSCC)Tca8113细胞过表达包含WW域的氧化还原酶(WWOX)基因的基因表达谱变化,探讨WWOX基因的抑癌作用机制.方法:Tca8113细胞分为WWOX基因过表达组和对照组.采用携带WWOX基因的pGV287-LV-WWOX慢病毒颗粒和携带空载体的pGV287-LV慢病毒颗粒分别感染2组Tca8113细胞.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting法检测2组Tca8113细胞中WWOX mRNA和蛋白表达情况.采用基因芯片技术筛选差异表达基因并进行生物学分析.采用定量PCR法检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的差异表达基因的mRNA相对表达水平.结果:慢病毒感染后,WWOX基因过表达组Tca8113细胞中WWOX mRNA相对表达水平较对照组明显升高(P<0.05),WWOX基因过表达组Tca8113细胞中WWOX蛋白表达水平升高.基因芯片筛选出差异倍数(FC)1.5倍以上的基因共347个,其中表达上调171个,表达下调176个.生物信息学分析显示这些基因分布于癌症、p53信号、MAPK信号和白细胞介素2(IL-2)等多条信号传导通路.WWOX基因过表达组MAPK信号通路中的丝裂原活化蛋白激酶2(MAP2K)、孤核受体4A1(NR4A1)、双特异性磷酸酶5(DUSP5)和双特异性磷酸酶6(DUSP6)mRNA相对表达水平较对照组明显升高(P<0.05),而成纤维生长因子受体2(FGFR2)mRNA相对表达水平较对照组明显降低(P<0.05).结论:WWOX基因过表达导致Tca8113细胞的基因表达谱发生变化,WWOX基因的抑癌作用机制与调节MAPK信号途径的多个基因表达有关联.