新型VEGF单克隆抗体与全反式维甲酸联合应用对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用
Inhibitory effect of new VEGF monoclonal antibody combined with all-trans retinoic acid on proliferation of breast cancer MCF-7 cells
摘要目的:探讨新型血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体、全反式维甲酸(ATRA)、新型VEGF单克隆抗体与ATRA联合用药对乳腺癌MCF-7细胞的影响,为乳腺癌的临床治疗提供新方案.方法:将MCF-7乳腺癌细胞分为对照组(不做任何处理)、VEGF抗体组(20 mg·L-1 VEGF抗体)、ATRA组(10μmol·L-1 ATRA)和VEGF抗体+ATRA组(20 mg·L-1VEGF抗体+10μmol·L-1 ATRA)4组,每组5个重复.加入不同药物处理MCF-7细胞48 h后,采用ELISA法检测新型VEGF抗体浓度,MTT法检测MCF-7细胞增殖率,流式细胞术检测MCF-7细胞凋亡率,免疫印迹法检测MCF-7细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达水平.结果:ELISA法检测,新型人类重组VEGF单克隆抗体浓度为200μg·L-1,与阳性抗体对照比较其质量良好.MTT法检测,与对照组比较,VEGF抗体+ATRA组MCF-7细胞增殖率明显降低(P<0.01).流式细胞术检测,与对照组、VEGF抗体组和ATRA组比较,VEGF抗体+ATRA组MCF-7细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与对照组比较,VEGF抗体组和ATRA组MCF-7细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与VEGF抗体组比较,ATRA组MCF-7细胞凋亡率升高(P<0.01).免疫印迹法检测,与对照组、VEGF抗体组和ATRA组比较,VEGF抗体+ATRA组MCF-7细胞中Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05);与对照组和VEGF抗体组比较,ATRA组MCF细胞中NF-κB蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.01).结论:新型VEGF单克隆抗体和ATRA可以抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、促进细胞凋亡,而二者联合用药的效果要显著优于单独用药.
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