换一批幽门螺杆菌对克拉霉素、甲硝唑和左氧氟沙星的耐药率及其相关耐药基因突变特征
Resistance rates of Helicobacter pylori to clarithromycin, metronidazole, and levofloxacin and mutation characteristics of their related drug resistance genes
摘要目的:检测幽门螺杆菌(Hp)对3种常见抗生素的耐药率,探讨其相关耐药基因突变形式,为阐明其耐药分子机制提供依据.方法:选择35例确诊为慢性胃炎或消化性溃疡患者的胃黏膜标本,分离培养鉴定Hp.采用琼脂稀释法检测Hp对克拉霉素、甲硝唑和左氧氟沙星的最小抑菌浓度(MIC),根据药敏试验结果分为敏感组和耐药组.通过PCR扩增克拉霉素耐药基因23S rRNA、甲硝唑耐药基因rdxA和左氧氟沙星耐药基因gyrA,PCR纯化产物测序后分析核苷酸和氨基酸突变位点.结果:Hp菌株培养3～5 d后,平板上可见光滑、半透明和针尖样小菌落.35株Hp均对甲硝唑和左氧氟沙星耐药,克拉霉素耐药率为80％(28/35).与敏感菌株比较,克拉霉素耐药菌株均发生基因突变,23S rRNA基因最常见的突变位点为A2143G,其次为突变位点A2223G和A2142G+A2164G;甲硝唑耐药菌株rdxA基因主要发生错义突变,其次为移码突变和无义突变;左氧氟沙星耐药菌株gyrA基因主要发生N87K突变,其次为D91N突变、N87I、D91G及N87K+D143E突变,17.1％的耐药菌株未发生任何位点突变.结论:Hp菌株对克拉霉素、甲硝唑和左氧氟沙星的耐药率较高,相关耐药基因突变是导致抗生素耐药的主要原因,筛选这些突变可能有助于防止抗生素耐药性及选择合适的抗菌药物根除Hp.
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