换一批小鼠各期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白的动态表达及其亚细胞定位
Dynamic expressions and subcellular localization of SGK3 m RNA and protein in oocytes of mice at different stages
摘要目的:检测小鼠各期卵母细胞中血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3(SGK3)mRNA和蛋白的表达及其亚细胞定位,为阐明SGK3 对小鼠卵母细胞周期变化的调控作用机制提供依据.方法:通过超排卵技术收集小鼠生发泡(GV)期、生发泡破裂(GVBD)期、第 1 次减数分裂(MⅠ)期卵母细胞和第2次减数分裂(MⅡ)期卵母细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测各期小鼠卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平,收集GV、GVBD和MⅠ期卵母细胞后采用Western blotting法检测小鼠各期卵母细胞中Cdc25B-Ser30的磷酸化表达情况,免疫荧光法观察小鼠各期卵母细胞中SGK3亚细胞定位情况.结果:在小鼠各期卵母细胞中均有SGK3 mRNA和蛋白表达.与GV期比较,GVBD和MⅡ期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01);与GVBD期比较,MⅠ期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01),MⅡ期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01);与MⅠ期比较,MⅡ期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01).Cdc25B-Ser30在GV期被去磷酸化,在GVBD和MⅠ期被磷酸化.小鼠的GV期卵母细胞中SGK3定位于细胞核膜,在GVBD期前进入细胞核,在GVBD期定位于细胞核,MⅠ期则分布于整个细胞,在MⅡ期则由细胞浆再次进入细胞核.结论:小鼠各期卵母细胞中SGK3均呈动态表达,SGK3存在核浆穿梭,SGK3定位的动态变化可能参与了细胞周期B的激活.
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关键词
血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶卵母细胞减数分裂动态表达亚细胞定位Serum and glucocorticoid-induced protein kinaseOocyteMeiosisDynamic expressionSubcellular localization
分类号
Q132
栏目名称
DOI
10.13481/j.1671-587X.20230514
发布时间
2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
内蒙古自治区科技厅自然科学基金项目（2021MS08158）
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