换一批抗单纯疱疹病毒1型的IgY制备及其生物学活性检测
Preparation of IgY against herpes simplex virus-1 and detection of its biological activity
摘要目的:制备抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的卵黄抗体(IgY),探讨该抗体的生物学活性,阐明其抗HSV-1的能力.方法:制备HSV-1灭活疫苗,采用鸡胸多点注射法免疫高产蛋鸡,采用聚乙二醇-6000(PEG-6000)法提纯IgY,采用间接ELISA法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术和蛋白浓度定量试剂盒测定IgY效价、纯度及蛋白水平,采用间接ELISA法检测IgY中和病毒的能力,测定病毒阻断率,以Vero细胞为病毒感染靶细胞,测定不同抗体浓度(0.015 60、0.031 25、0.062 50、0.125 00、0.500 00、和 1.000 00 g·L-1)作用后细胞病变效应(CPE),根据CPE程度测定IgY体外抗HSV-1能力.结果:制备的IgY效价随免疫时间逐渐升高,达到1/1 024 000后保持稳定;IgY轻链重链条带清晰;IgY平均蛋白水平为11.544 g·L-1;IgY对HSV-1的阻断率可高达77.90%;HSV-1致CPE程度随抗体浓度升高而逐渐降低,当IgY浓度达到0.500 00 g·L-1及以上时,25%以下细胞(甚至无细胞)发生病变.结论:成功制备出抗HSV-1的IgY,该抗体对HSV-1具有明显的中和阻断能力和体外抑制活性,可用于药物及诊断方法的开发.
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关键词
单纯疱疹病毒1型卵黄抗体中和病毒体外抗病毒能力Herpes simplex virus-1Egg yolk antibodyNeutralizing virusAntiviral ability in vitro
分类号
S852.43
栏目名称
DOI
10.13481/j.1671-587X.20240202
发布时间
2024-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
吉林省科技厅科技创新基地(平台)建设项目（YDZJ202302CXJD054）
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