摘要目的:探讨槲皮素对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的人永生化角质形成细胞(HACAT)损伤的保护作用,并阐明其作用机制.方法:将HACAT细胞分为对照组(正常培养细胞)、5-FU组(7.5 mg·L-1 5-FU作用于HACAT细胞24h)和低、中及高剂量槲皮素组(25,50和75 μmol·L-1的槲皮素与7.5mg·L-1 5-FU共同作用于HACAT细胞24h).采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测不同剂量(0、10、25、50、75和100 μmol·L-1)槲皮素处理后各组HACAT细胞存活率,活性氧(ROS)荧光探针法检测各组HACAT细胞中ROS水平,荧光素标记的Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法检测HACAT细胞凋亡情况,Western blotting法检测各组HACAT细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、环氧合酶2(COX-2)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)蛋白表达水平.结果:CCK-8法检测,与0 μmol·L-1槲皮素组比较,10、25、50和75μmol·L-1槲皮素组HACAT细胞存活率无明显变化,差异无统计学意义(P＞0.05),而100 μmol·L-1槲皮素组HACAT细胞存活率明显降低(P＜0.05);与5-FU组比较,低、中和高剂量槲皮素组细胞存活率明显升高(P＜0.05).ROS荧光探针法检测,与5-FU组比较,低、中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中ROS水平明显降低(P＜0.05).AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测,与5-FU组比较,低、中和高剂量槲皮素组HACAT细胞凋亡率明显降低(P＜0.05).Western blotting法检测,与5-FU组比较,中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P＜0.05);低、中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显降低(P＜0.05);中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中COX-2蛋白表达水平明显降低(P＜0.05);中剂量槲皮素组HACAT细胞中IL-1β和IL-6蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).结论:槲皮素对5-FU诱导的HACAT细胞损伤具有保护作用,其机制可能与减少ROS和COX-2等炎症因子表达从而抑制细胞凋亡有关.