摘要目的:通过人真皮毛乳头细胞(HDPCs)体外实验、C57BL/6小鼠体内实验和人体功效测试,探讨防脱育发液(CHAaHGS)对毛发生长的影响,阐明其潜在作用机制.方法:将HDPCs分为对照组、CHAaHGS组和米诺地尔组.采用MTT法检测各组HDPCs增殖活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组HDPCs上清液中血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组HDPCs中VEGF、HGF、IGF-1、TGF-β1和碱性磷酸酶(ALP)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组HDPCs中β-连环蛋白(β-catenin)、蓬乱蛋白1(DVL1)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)和无翅型MMTV整合位点家族蛋白(Wnt)家族成员3a(Wnt3a)蛋白表达水平.取18只小鼠随机分为对照组、CHAaHGS组和米诺地尔组,每组6只.采用脱毛膏建立小鼠脱毛模型,脱毛后立即给予相应药物处理.检测第21天各组小鼠新生毛发长度和毛发质量,采用HE染色观察各组小鼠第7天背部脱毛区皮肤毛囊形态表现,ELISA法检测各组小鼠背部脱毛区皮肤组织中VEGF、HGF、IGF-1和TGF-β1水平.将60名受试者随机分成对照组和CHAaHGS组,每组30名.检测第0、4、8和12周各组受试者脱发数量和毛发密度.结果:MTT法,与对照组比较,50 mg·L-1 CHAaHGS组细胞增殖活性明显升高(P<0.01).ELISA法,与对照组比较,CHAaHGS组细胞上清液中VEGF、HGF和IGF-1水平明显升高(P<0.05或P<0.01),TGF-β1水平明显降低(P<0.01).RT-qPCR法,与对照组比较,CHAaHGS组细胞中VEGF、HGF、IGF-1和ALP mRNA表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),TGF-β1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01);Western blotting 法,与对照组比较,CHAaHGS 组细胞中 β-catenin、DVL1、p-GSK-3β 和 Wnt3a 蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),GSK-3β蛋白表达水平明显降低(P<0.05).动物实验,第21天时,与对照组比较,CHAaHGS组小鼠新生毛发长度明显增长(P<0.05),毛发质量明显增加(P<0.01).第7天时,HE染色,与对照组比较,CHAaHGS组小鼠毛囊间距明显减少(P<0.05),毛囊数量明显增加(P<0.01);ELISA法,与对照组比较,CHAaHGS组小鼠脱毛区皮肤组织中VEGF、HGF 和 IGF-1 水平明显升高(P<0.05 或 P<0.01),TGF-β1 水平明显降低(P<0.05).人体功效试验测试,与对照组比较,第12周时CHAaHGS组受试者脱发数量明显减少(P<0.01),局部毛发密度增加(P<0.05).结论:CHAaHGS对毛发生长具有促进作用,其机制可能与其增加HDPCs增殖活性,诱导VEGF、HGF和IGF-1分泌及激活Wnt/β-Catenin信号通路有关.
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